186株銅綠假單胞菌β-內酰胺酶檢測及藥敏分析

【摘要】  　　目的：了解銅綠假單胞菌對抗生素的耐藥情況，為臨床治療提供依據。方法：收集臨床不同感染部位標本中分離到的186株銅綠假單胞菌進行β內酰胺酶的檢測及藥敏測定結果分析。結果：186株銅綠假單胞菌對所測試的11種抗生素耐藥5種以上的有72株，占38.7%，其中β內酰胺酶陽性的60株，占32.4%，β內酰胺酶陰性的有12株，占6.3%。結論：產β內酰胺酶的銅綠假單胞菌的耐藥性更加嚴重，目前亞胺培南是治療銅綠假單胞菌感染的首選藥物，其次是丁胺卡那和頭孢他啶。

【關鍵詞】  銅綠假單胞菌； β內酰胺酶； 耐藥性

　　1   材料和方法

　　1.1  材料

　　1.1.1   標本來源  收集本院2003年1月～2006年12月患者痰、咽分泌物、傷口分泌物、尿液、血液等標本中分離的186株銅綠假單胞菌。

　　1.1.2  質控菌株  銅綠假單胞菌ATCC 27853。

　　1.1.3  抗生素紙片  頭孢他啶、慶大黴素、呱拉西林、頭孢呱酮、丁胺卡那、氨曲南、環丙沙星、亞胺培南、頭孢噻肟、氯黴素、複方新諾明11種，均為法國生物梅裏埃公司產品。

　　1.1.4  細菌鑒定  法國生物梅裏埃公司ATB全自動細菌分析儀。

　　1.1.5  MH藥敏瓊脂  杭州天和微生物試劑有限公司產品。

　　1.2  方法

　　1.2.1  細菌培養  按全國臨床檢驗操作規程（第2版）進行，將取獲得的純培養菌落用法國生物梅裏埃公司ATB全自動細菌分析儀進行鑒定。將亞胺培南紙片貼於MH平皿中央，在其兩側距紙片中央24mm處貼頭孢呱酮、頭孢曲鬆紙片，經35℃溫箱18～24h觀察結果，任何一種或二種紙片抑菌環有“半扣樣”切跡則為陽性，否則為陰性。

　　1.2.2  藥敏試驗  按NCCLS（2006版）規定進行KB法藥敏試驗，並從銅綠假單胞菌ATCC 27853進行質量控製。

2  結果

　　2.1   186株銅綠假單胞菌對抗生素的藥敏情況

   

　　對亞胺培南、丁胺卡那、頭孢他定的敏感性較高，敏感率均在80%以上，而對頭孢噻肟、慶大黴素、複方新諾明、氯黴素等抗生素表現出較高的耐藥性，耐藥率均在50%以上。特別是複方新諾明和氯黴素，耐藥率在90%以上，抗生素耐藥情況見表1。

　　表1  186株銅綠假單胞菌對11種抗生素的藥敏結果（略）

　　2.2   產β內酰胺酶的銅綠假單胞菌的耐藥情況

　　表2  186株銅綠假單胞菌β-內酰胺酶檢測及耐藥分析（略）

　　186株銅綠假單胞菌中有103株產β內酰胺酶，占55.4%比高堂玲［1］等報道的75.7%低。β內酰胺酶陰性的銅綠假單胞菌對丁胺卡那、環丙沙星、亞胺培南、頭孢他啶、呱拉西林等表現出高度的敏感性，均在90%以上；其次是氨曲南、慶大黴素、頭孢呱酮等，敏感率在70%左右。對氯黴素、複方新諾明有較高的耐藥性，耐藥率＞80%。產β內酰胺酶的銅綠假單胞菌對亞胺培南敏感性最高，敏感率91.3%；其次是丁胺卡那、頭孢他啶，敏感率分別是77.7%、74.8%。對慶大黴素、呱拉西林、頭孢噻肟有較高的耐藥性，耐藥率均為60%，氯黴素、複方新諾明幾乎全部耐藥。186株銅綠假單胞菌β內酰胺酶的檢測及耐藥情況見表2。

3   討論

   

　　銅綠假單胞菌是革蘭陰性杆菌中分離率最高的機會致病菌之一，也是臨床上最常見的致病菌，是引起醫院感染的重要病原菌之一。由於抗生素的廣泛使用耐藥性不斷增強，多重耐藥性已成為臨床治療的難點，其耐藥機理是產β內酰胺酶，細菌外膜的通透性降低，菌體青黴素結合蛋白酶（PBPS）的結構和功能的改變［2］，以及帶有耐藥質粒的介導［3］。當細菌接觸到亞抑製濃度的頭孢菌素時，即被誘導產生頭孢菌素酶，對氨基糖苷類藥物的耐藥則是產生修飾酶對抗生素的滅活。本研究顯示銅綠假單胞菌對測試的11種抗生素耐藥5種以上的占近40%，表明β內酰胺酶銅綠假單胞菌的耐藥性更加重要。至今，亞胺培南為治療銅綠假單胞菌感染的首選藥物，其次是頭孢他啶及丁胺卡那，隨著第三代頭孢菌素的廣泛應用和濫用以及新的β內酰胺酶的出現，導致銅綠假單胞菌對第三代頭孢菌素的耐藥性日趨嚴重，本研究顯示銅綠假單胞菌對頭孢噻肟的敏感率僅為11.8%，因此，嚴格控製三代頭孢菌素的大劑量應用是臨床迫切需要解決的問題。氨基糖苷類藥物的敏感性成下降趨勢，複方新諾明及氯黴素的耐藥率＞90%，臨床治療時不應選用。

   

　　銅綠假單胞菌的多重耐藥是醫院感染和病人久治不愈的主要原因，因此患感染性疾病的病人應取可疑標本做細菌培養及藥敏檢測後，選擇最有效、最適合其本人使用的抗生素，在治療過程中根據具體情況密切注意抗生素的敏感性來調整治療方案，對減少耐藥菌株有著重要的意義。

 

作者：陳桂申  《數理醫藥學雜誌》

【參考文獻】

  　　1 高堂玲，李慧華，何春蓉.呼吸病區銅綠假單胞菌耐藥性監測.現代中西醫結合雜誌，2001，10（12）：1171～1172.

　　2 李彤，褚雲卓.ICU病房痰標本中常見革蘭陰性杆菌及其藥敏結果分析.中國實驗診斷學雜誌，2007，11（6）：824～825.

3 康梅，韓琳林，陳慧莉，等.危重監護病房銅綠假單胞菌耐藥性及脈衝場凝膠電泳分析.中國抗生素雜誌，2004，29（5）：293.