大腸埃希菌ESBLs的狀況及藥敏分析

【摘要】  目的：了解大腸埃希菌產ESBLs的狀況及對常用抗生素的藥敏情況。方法：用紙片法檢測ESBLs。藥敏試驗采用KB瓊脂擴散法。結果：從本次試驗中的400株大腸埃希菌中，ESBLs檢出率為61.50%（246/400），其中2005年組ESBLs檢出率為52.94%（90/170），低於2006年組的67.83%（156/230），而在藥敏試驗方麵僅2.5%（10/400）對任何抗生素沒產生耐藥，耐兩種或兩種以上抗生素的占95.00%（380/400）。結論：臨床要有計劃地使用各種抗生素類藥物，防止更多的ESBLs陽性菌株的形成。

【關鍵詞】  大腸埃希菌；超廣譜β內酰胺酶；藥敏分析

   大腸埃希菌是醫院臨床標本中分離的常見細菌［1］，由於現時各種抗生素的廣泛應用，甚至是濫用，使大腸埃希菌對各種抗生素的敏感率不斷下降，據相關文獻報道［2］，大腸埃希菌對頭孢他啶、頭孢噻肟、頭孢曲鬆等應用廣泛的抗生素敏感率分別為86.5%、45.8%、40.3%，並且有逐年下降的趨勢。另據其他文獻報道［1］，大腸埃希菌對呱拉西林和頭孢呱酮的耐藥率為40.4%和23.0%，而對呱拉西林/他唑巴坦和頭孢呱酮/舒巴坦的耐藥率均為0，顯而這些耐藥的產生，與大腸埃希菌產ESBLs不無關係。為此，我們對本院臨床不同時間分離到的400株大腸杆菌進行ESBLs檢測，並了解該菌對各種抗生素的耐藥性，以及對各種抗生素耐藥性的變遷，以指導臨床對抗感染用藥。

　　1  材料與方法

　　1.1  菌株來源 

　　試驗菌株分別為2005年1月至2005年12月（下文簡稱為“2005年組”）和2006年1月至2006年12月（下文簡稱為“2006年組”）我院住院及門診患者非大便標本分離的大腸埃希菌400株。

　　1.2  菌株鑒定 

　　按《全國臨床檢驗操作規程》進行，分離培養得到的菌株用美國DADE公司生產的MicroWalkAway-40全自動微生物分析儀進行鑒定。

　　1.3  質控菌株 

　　分別以大腸埃希菌ATCC25922和肺炎克雷伯菌ATCC700603作為ESBLs試驗陰性和陽性的菌株。

　　1.4  藥敏試驗 

　　采用KB 法,MH 瓊脂培養基。藥敏紙片：阿米卡星、氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、氨曲南、頭孢曲鬆、頭孢他啶、頭孢噻吩、頭孢呱酮、頭孢噻肟、頭孢西丁、頭孢唑啉、環丙沙星、亞胺培南、呱拉西林、替卡西林、替卡西林/克拉維酸、複方新諾明，以上藥物均為英國OXOID公司生產，經室內質控符合要求，並在有效期內使用。所有的判定結果按CLSI／NCCLS(臨床實驗室標準研究所Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI)2005版的規定［3］。

1.5  ESBL檢測方法 

　　藥敏紙片初篩和確證試驗按CLSI／NCCLS推薦進行測定，CAZ ≤22 mm ,CTX ≤27 mm ,AZT ≤27 mm ,CFP ≤24 mm ,其中1 種藥敏結果符合此值時,該菌需做確證試驗。含克拉維酸與不含克拉維酸抗生素紙片間抑菌區直徑≥5 mm 可判為ESBLs陽性,質控菌抑菌區直徑增大≤2 mm。

　　2  結果

    從本次試驗中的400株大腸埃希菌中，ESBLs檢出率為61.50%（246/400），其中2005年組ESBLs檢出率為52.94%（90/170），低於2006年組的67.83%（156/230），而在藥敏試驗方麵僅2.5%（10/400）對任何抗生素沒產生耐藥，而耐兩種或兩種以上抗生素的占95.00%（380/400），具體見表1。表1  400株大腸埃希菌對17種常用的抗生素的耐藥率比較(略)

　　3  討論

    超廣譜β內酰胺酶是一類能水解青黴素、頭孢菌素類及單環β2內酰胺類抗生素、能被β內酰胺酶抑製劑抑製的β內酰胺酶。ESBLs細菌的β內酰胺酶基因位於質粒上,通過轉化、轉導、轉座、接合轉移和整合方式,將耐藥性在不同細菌中傳播,容易造成耐藥細菌的流行 。ESBLs 主要存在於KPN和ECO 中。ESBLs是一種由質粒介導的，能夠令細菌對多種β內酰胺類藥物產生耐藥，能被β內酰胺酶抑製劑（如克拉維酸等）抑製的一種絲氨酸蛋白酶。目前隨著β內酰胺類抗生素的廣泛應用，對各種細菌均形成一個高的β內酰胺類藥物的抗生素壓力，使大量的耐藥基因定位到質粒上，並令耐藥菌株被選擇出來，使大多數細菌通過耐藥質粒而獲得對β內酰胺類藥物耐藥性，對臨床控製感染應用β內酰胺類藥物造成一定的威脅。

    本文顯示ESBLs檢出率為61.50%（246/400），ESBLs（+）的大腸埃希菌僅對亞胺培南沒有產生任何耐藥外，隻有阿米卡星、頭孢西丁的耐藥率比較低，分別為1.2%和4.47%，對其他抗生素的抗生素的耐藥率均超過50%。而ESBLs(-)的大腸埃希菌除對亞胺培南沒有產生任何耐藥外，頭孢他啶也沒有產生任何耐藥，此外對氨苄西林/舒巴坦、阿米卡星、氨曲南、頭孢曲鬆、頭孢噻吩、頭孢噻肟、頭孢西丁、頭孢唑啉、頭孢呋肟產生耐藥都均在20%以下。根據CLSI／NCCLS規定,對ESBLs 菌株,應報告對所有青黴素類、頭孢菌素類和氨曲南耐藥。

    從本文顯示，本院2005年組ESBLs(+)和2006年組ESBLs(+)及2006年組ESBLs(-)和2006年組ESBLs(-)對比中除氨苄西林/舒巴坦和複方新諾明外，其他各種抗生素的耐藥率不斷程度的上升，其中ESBLs（+）組以慶大黴素耐藥率上升較為明顯，由2005年的12.82%上升到2006年的53.33%，而ESBLs(-)組則以頭孢噻吩耐藥率上升較為明顯，由2005年的6.76%上升到2006年的26.67%。

    本文顯示，本院ESBLs(+)和同期ESBLs(-)對比中，ESBLs(+)對除亞胺培南外的各種抗生素耐藥率均遠遠高於同期的ESBLs(-)的大腸埃希菌。

從本次試驗結果來看,由於大腸埃希菌ESBLs(+)率不斷升高,故此,對於懷疑為由大腸埃希菌感染造成的危重患者應建議臨床醫生使用含β內酰胺酶抑製劑的抗生素或使用亞胺培南。另外,由於細菌產生耐藥,與大量在各行業使用抗生素有密切的關係,故此,及早了解各患者分離株的藥敏試驗結果,建議臨床有效並合理用藥,這將更有利於臨床對單—患者的感染治療,也將更有利於控製細菌對各種抗生素的耐藥率上升,也對防止細菌產生新的耐藥性有重要意義。

 

作者：陳月燕，席雲，曲彩紅，譚泳泉  《實用醫技雜誌》

【參考文獻】

［1］李家泰，李耘，齊慧敏.2002年至2003年中國革蘭陰性細菌耐藥性檢測研究［J］.中華檢驗醫學雜誌，2005，28（1）：1929.

［2］王輝，陳民鈞，倪語星，等.2003年至2004年中國十家教學醫院革蘭陰性杆菌的耐藥分析［J］.中華醫學檢驗雜誌，2005，28（12）.　　

［3］Clinical and Laboratory Standards Institute/NCCLS. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing, Fifteenth informational supplement. CLSI/NCCLS document M100S15［S］.Clinical and Laboratory Standards Institute Wayne Pennsylvania,2005,25(1):1167.