淮北市2006年質控菌株檢驗結果分析

【摘要】  目的：加強微生物實驗室的質量控製工作，提高對腸道傳染病疫情檢測水平。方法：用細菌培養法對質控菌株進行增菌、分純，依據細菌生長特性、革蘭染色形態、生化試驗和血清學試驗結果綜合判斷。結果：質控菌株為傷寒沙門菌純菌種，質控考核成績優秀。結論：質控菌株考核既重結果，也重過程，能及時發現平時工作中存在的問題。建議多加強對基層微生物實驗室的質控考核工作，促進疾病控製機構衛生檢測水平的不斷提高。

【關鍵詞】  質控；分析；細菌培養

 

　　Analysis of testing qualitycontrolling Strains of huaibei city in 2006

　　Abstract:Objective To improve the quality control work in microorganism laboratories and the level of detecting enteric infectious diseases.Methods Bacterium culture method was applied to enrich and isolate the qualitycontrol strains；comprehensive judgment was made according to the growth character、shape of Cram strain、the results of biochemistry experiments and serologic tests.Results The qualitycontrol strain was proved to be pure agarics of salmonella typhi；the result was excellent.Conclusion The qualitycontrol supervision work is suggested to be given great emphasis in order to improve the hygienic detection work of the disease control institutions.

　　Key words:Qualitycontrol strains；Analysis；Bacterium culture

　　我中心近幾年均參加安徽省疾病控製係統實驗室間比對和能力驗證試驗，接受質控菌株的分離鑒定工作，不斷提高細菌檢驗水平。現將2006年11月的微生物實驗室間比對考核情況及結果報告如下。

　　1  材料與方法

　　1.1  質控樣品  安徽省CDC下發的半固體質控菌株1份，既可能是混合菌種，也可能是純菌種。該樣品是腸道致病菌培養物，屬需氧或兼性厭氧菌。

　　1.2  檢測依據  微生物學和微生物學檢驗。

　　1.3  材料  本次質控所用培養基、試劑購於北京陸橋醫學生物技術中心、杭州微生物試劑有限公司。診斷血清：沙門菌屬診斷血清由成都生物製品研究所生產，有效期內使用。

　　1.4  檢驗步驟

　　1.4.1  增菌  無菌操作開啟半固體菌種管，取半固體培養物置10 ml營養肉湯管混合均勻，37 ℃培養18 h。

　　1.4.2  菌種分純及鑒定  取肉湯增菌液各一環，分別接種分離於SS、麥康凱瓊脂平板、山梨醇麥康凱瓊脂平板、血平板、營養瓊脂平板、四號瓊脂平板，37 ℃ 24 h培養，觀察菌落特征，挑取各種不同可疑菌落接種於三糖鐵上做初步生化反應，同時取菌苔塗片做革蘭染色鏡檢，取營養瓊脂平板上菌落做氧化酶實驗，綜合分析生長特性及生化特點，對疑似菌做血清學凝集試驗及生化鑒定試驗。

2  檢驗結果

　　肉湯增菌液呈均勻渾濁，分離接種培養後，在SS平板上生長出中等大小、光滑濕潤、無色半透明菌落，在麥康凱平板上生長出中等大小、光滑濕潤、無色半透明菌落，在山梨醇麥康凱瓊脂平板上生長出中等大小、粉紅色菌落，在血平板上生長出中等大小、灰白色、邊緣整齊、不溶血菌落，在營養平板上生長出中等大小、圓形、光滑濕潤菌落，在四號瓊脂平板上不生長。塗片染色：此菌為革蘭陰性小杆菌。氧化酶實驗：陰性。三糖鐵結果為：斜麵-、底層+、產氣+、硫化氫+。腸杆菌科生化編碼結果，見表1。

　　表1  腸杆菌科生化編碼結果（略）

　　注：鑒定編碼62054；查檢索表得兩種可能結果為：①傷寒沙門氏菌，概率88.90%；②沙門氏菌屬某些種，概率9.80%。   

　　沙門菌血清凝集試驗結果如下：AF多價血清-；vi因子血清++++；Hd因子血清+；生理鹽水對照-。用滅菌生理鹽水將普通瓊脂斜麵上菌苔洗下，製成濃厚菌液，加熱100 ℃ 40 min，用處理過的濃厚菌液與沙門氏AF多價凝集，結果：AF多價血清++++；生理鹽水對照-；O9因子血清+++。依據細菌在各培養基上生長特性、革蘭染色形態、生化和血清試驗結果，綜合判斷為傷寒沙門菌(O9Hd)。上報安徽省疾控中心，結果完全正確。

　　3  討論與小結

　　由基本生化特性可知，本菌株為發酵型糖代謝，有動力，氧化酶陰性的革蘭陰性杆菌，符合腸杆菌科或弧菌科。根據四號瓊脂平板上不生長，SS瓊脂平板上生長良好，可排除弧菌科，定為腸杆菌科。在做沙門菌血清凝集時，最好用兩個不同廠家生產的血清或用不同批號的血清進行核對，以防錯漏。在做沙門菌血清凝集時，應注意挑取瓊脂幹燥處培養物與多價及O因子血清進行凝集試驗，其效果較好，而瓊脂濕潤處培養物與O多價及O因子血清凝集不明顯，原因是瓊脂幹燥處培養物O抗原發育較好［1］。試驗時應注意：與多價抗血清不凝集時，可在玻璃試管內用生理鹽水將細菌製成濃菌液，放入沸水中15 min～30 min，冷卻後再次做凝集試驗。因vi抗原能阻斷O凝集反應，而煮沸處理能破壞菌體表麵的vi抗原［2］。 這次的傷寒沙門菌，我們經加熱100 ℃ 40 min破壞Vi抗原才得到AF多價血清明顯凝集。對AF多價血清不凝集的菌株，容易漏檢，經過詳細的生化鑒定及用加熱法破壞Vi抗原，再進行血清試驗才可檢出傷寒沙門菌，所以詳細的生化鑒定是必要的。根據細菌在選擇性平板上的菌落特點與各種菌落生化特性、血清學試驗結果的一致性，可判斷此質控菌株為純菌種。總之，平時做好細菌檢驗室內質量控製，對所用培養基、生化試劑、診斷血清等進行質量驗收，是做好室間質控的重要基礎。經常參加室間質量控製考核，有利於督促和提高檢驗人員的業務水平和檢測水平，增加檢驗結果的正確性和可靠性。

 

 作者：趙冬雲《實用醫技雜誌》

  　［1］ 王秀茹.預防醫學微生物學及檢驗技術［M］.北京：人民衛生出版社，2002：315.

［2］ 餘樹榮.微生物學和微生物學檢驗［M］.北京：人民衛生出版社，1997：181.