院內和社區感染大腸埃希菌超廣譜β內酰胺酶的檢測及結果分析

【摘要】  目的：了解院內和社區感染患者標本中分離的大腸埃希菌超廣譜β內酰胺酶(ESBLs)的產生及耐藥情況。方法：采用體外擴散確證試驗檢測ESBLs，同時用VITEKAMS和KB瓊脂擴散法進行體外藥敏試驗。結果：社區感染標本中分離出大腸埃希菌86株，產ESBLs菌株28株，陽性率為32.6%（28/86），其中尿液標本中分離出42株，產ESBLs菌株17株，陽性率為40.5%（17/42）；院內感染標本中分離出大腸埃希菌95株，產ESBLs菌株50株，陽性率為52.6%（50/95），其中尿液標本中分離出53株，產ESBLs菌株22株，陽性率為41.5%（22/53）。ESBLs陽性株對多種抗生素耐藥，其耐藥性明顯高於ESBLs陰性株。結論：本地區ESBLs產生情況十分嚴重。從總體看，社區和醫院感染大腸埃希菌ESBLs產生率存在明顯差異，但從尿液標本中分離的大腸埃希菌其ESBLs產生率差異無顯著性。應再抗感染治療，尤其是社區經驗治療中，控製廣譜抗生素的使用。

【關鍵詞】  大腸埃希菌；超廣譜β內酰胺酶；檢測及分析

 

    超廣譜β內酰胺酶(extendedspectrumβlactamase，ESBLs)是能滅活超廣譜頭孢菌素、窄譜頭孢菌素、單環類及青黴素等抗生素的一類β內酰胺酶，其產生和傳播認為是目前革蘭陰性菌產生耐藥的主要原因之一，且其通過質粒介導，可在同種或異種細菌間傳播，易引起醫院感染的爆發流行［1］。廣譜抗生素特別是β內酰胺類抗生素的廣泛使用是導致ESBLs菌株產生的主要原因。因此，了解本地區，尤其是社區感染中ESBLs產生及耐藥情況，對調整和合理使用抗生素，提高治療效率有重要意義。本文對院內和社區感染標本中分離的181株大腸埃希菌進行ESBLs的檢測與體外藥敏試驗，報道如下。

　　1  材料與方法

　　1.1  材料

　　1.1.1  菌株來源 

　　181株大腸埃希菌分離自本院2007年1月至2007年6月臨床送檢的各類標本，其中社區感染標本中分離86株，醫院感染標本中分離95株，經手工方法和VITEK60型全自動細菌分析儀鑒定。

　　1.1.2  儀器及卡片 

　　VITEK60型全自動細菌分析儀，GNS506藥敏檢測卡均為法國梅裏埃公司產品。

　　1.1.3  藥敏紙片 

　　頭孢噻肟/克拉維酸(ctx/clav,30 μg/10 μg),頭孢他啶/克拉維酸(caz/clav,30 μg/10 μg)，頭孢噻肟(ctx,30 μg),頭孢他啶(caz,30 μg),氨曲南(atm,30 μg),頭孢曲鬆(crx,30 μg)為Oxiod公司產品；其他藥敏紙片為浙江省軍區後勤防疫檢驗所產品。

　　1.1.4  MH瓊脂 

　　購自浙江省軍區後勤檢疫所。

　　1.2  方法

　　1.2.1  ESBLs檢測 

　　按1999年NCCLS推薦的標準紙片擴散確證法測定ESBLs［2］，采用頭孢他啶(30 μg)及頭孢他啶/克拉維酸(30 μg/10 μg)組合，頭孢噻肟(30 μg)及頭孢噻肟/克拉維酸(30 μg/10 μg)組合，任一組藥物的抑菌環的直徑差≥5 mm時，判定為ESBLs陽性株。

1.2.2  藥敏試驗 

　　VITEK60型全自動細菌分析儀及KB瓊脂擴散法檢測細菌的耐藥性，嚴格按要求操作和判斷結果，質控菌株為大腸埃希菌ATCC25922。

　　2  結果

　　2.1  不同來源大腸埃希菌的ESBLs產生情況 

　　分離自醫院感染及社區感染各類標本中的181株大腸埃希菌的ESBLs檢出情況見表1。表1  不同來源大腸埃希菌的ESBLs檢出情況（略）

　　2.2  ESBLs陽性菌株與ESBLs陰性菌株對常用抗生素的耐藥率比較 

　　見表2。表2  181株大腸埃希菌15種抗生素的耐藥性比較（略）

　　3  討論

    ESBLs主要由腸杆菌科細菌產生，尤其以肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌為主。ESBLs由質粒介導，可通過接合、轉化和轉導等方式在細菌中擴散，國內外不斷有ESBLs流行及引起醫院感染的報道［3］。本文所測大腸埃希菌ESBLs總陽性率達43.1%，高於國內有關報道［3，4］。從本次實驗結果看，醫院感染標本中分離的大腸埃希菌總ESBLs陽性率（52.6%）明顯高於社區分離菌株的ESBLs陽性率（32.6%）。造成這一現象的原因，除了廣譜抗生素大量使用的影響外，還與住院患者相對於社區患者免疫力、抵抗力低下易受感染及使用插入性的呼吸機、導管等器械和醫護人員在治療、護理過程中操作不當，引起交叉感染有關［5］。因此，嚴格進行無菌操作消毒隔離是減少ESBLs陽性耐藥菌播散的有效方法之一。

    值得注意的是，本試驗中社區感染標本中分離的大腸埃希菌ESBLs陽性率已達32.6%，尤其是其尿液標本中分離的大腸埃希菌的陽性率（40.5%），與醫院感染中分離菌株的ESBLs陽性率（41.5%）接近，我們認為，主要原因是由於社區感染患者往往自行用藥或到社區診所或基層醫院就診後在沒有抗生素敏感試驗指導下經驗用藥，而目前社區醫療存在抗生素使用率高、用藥起點高等特點，尤其是廣譜及三代頭孢菌素的使用相當普遍。三代頭孢菌素使用後，75%以上以原液的形式從腎髒排泄，作為尿道正常定植的大腸埃希菌，在廣譜抗生素強選擇性壓力下產生ESBLs陽性耐藥株，這種潛在的耐藥菌株在機體抵抗力下降及菌群失調等情況下即增殖成為致病菌。因此，必須重視感染菌的耐藥性檢測，加強社區抗生素使用的管理，改變抗生素使用習慣，以控製社區ESBLs陽性耐藥菌進一步產生和蔓延。

 

從表2可以看出，ESBLs陽性菌株呈多重耐藥，除對三代頭孢菌素、阿莫西林/棒酸、氨苄西林、呱拉西林、頭孢西丁、氧氟沙星、複方新諾明高度耐藥外，對丁胺卡那、妥布黴素等其他抗生素也有較高的耐藥性；ESBLs陽性株多種抗生素的耐藥率明顯高於非產酶菌株，經統計學處理，差異有非常顯著性。所有產ESBLs菌株對亞胺培南高度敏感，對頭孢呱酮／舒巴坦、呱拉西林／他唑巴坦和呋喃妥因也有較高的敏感性，因此，對ESBLs陽性菌株的治療，可首選亞胺培南和含β內酰胺酶抑製劑和β內酰胺藥物的複合劑。呋喃妥因其口服吸收迅速而完全，在尿液中濃度高，建議在上述致病菌引起的尿路感染中考慮選用。

 作者：方海俊，駱婷婷《實用醫技雜誌》

【參考文獻】

  　　［1］Palacha A,Mikiwicz B,Gniadkowski M.Diversification of Escherichia coli expressing an SHVtype extendedspectrum betalactamase( ESBLs) during a hospital outbreak: emergence of an ESBLhyperproducing strain resistant to expandedspectrum cephalosporins［J］. Antimicrob Agents Chemother,1999,43:393.

　　［2］National Committee for Clinical Laboratory Standards. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing［J］. M100S9,Pennsylvania:NCCLS,1999,19:3675.

　　［3］祝建軍,宋秀蘭,丁曙光,等.超廣譜β內酰胺酶細菌致醫院感染［J］.中華醫學檢驗雜誌,2001,24(4):238.

　　［4］彭少華,李從榮,施菁玲,等.超廣譜β內酰胺酶細菌的檢測及耐藥性［J］.中華醫學檢驗雜誌,2001,24(6):350352.

      ［5］Pena C,Pujol M,Ricart A,et al.Risk factors for faecal carriage of Klebsiella pneumoniae producing extendedspectrum betalactamase( ESBLKP) in the intensive care unit［J］. J Hosp Infect,1997,35:9.