注射用對氨基水楊酸鈉為抗結核藥。現有標準［1］采用家兔法進行熱原檢查，本文采用細菌內毒素檢查法，通過幹擾實驗，建立了其細菌內毒素限量檢查的方法。現報道如下。
1 材料
鱟試劑（TAL，福州東方鱟試劑廠，批號：011225，規格：λ=0.5Eu/ml並經複核符合規定）；細菌內毒素工作標準品（福州東方鱟試劑廠，批號：011225）；注射用對氨基水楊酸鈉（哈爾濱製藥總廠，批號：B020401，BO20601，BO20926，規格：2g,經熱原測定均符合規定）。電熱恒溫水浴箱：上海醫療器械五廠。旋渦混合器：上海亞榮生化儀器廠。
2 方法與結果
2.1 細菌內毒素限值（L）的計算［2，3］ 藥典的熱原檢查（RT）方法是：取本品，加滅菌注射用水製成20mg/ml的溶液，劑量按家兔體重每1kg注射10ml，即劑量為200mg/kg，人體靜脈注射致熱閾值（K）=5.0Eu/kg，則L=K/M=0.025Eu/mg［2］。
2.2 最大有效稀釋倍數的確定 將本品用BET水稀釋成20mg/ml的溶液，其細菌內毒素不得超過0.025×20=0.5Eu/ml，則應用靈敏度（λ）0.5、0.25、0.125、0.06的鱟試劑，選擇的稀釋倍數分別為：1倍、2倍、4倍、8倍。
2.3 幹擾實驗的預實驗 取一批RT檢查合格的供試品，用BET水將其配成20mg/ml的溶液，再做2倍、4倍、8倍稀釋。用原液及稀釋液來溶解並稀釋細菌內毒素工作標準品，使內毒素含量均為1.0Eu/ml，與鱟試劑反應（λ=0.5Eu/ml），並做陰性對照，每一濃度做2管，結果本品對細菌內毒素檢查未見抑製作用。
2.4 幹擾實驗 取3批RT檢查合格的供試品，用BET水配製成20mg/ml的溶液，用此溶液和BET水將細菌內毒素工作標準品稀釋成1.0、0.5、0.25、0.125Eu/ml的溶液，與鱟試劑反應（λ=0.5Eu/ml），每個濃度做4管，結果見表1。從表1的結果看，鱟試劑在ET水和3個批號供試品中的λ值為0.25～0.5Eu/ml，均在0.5～2.0λ範圍內，符合中國藥典對細菌內毒素檢查有效性的規定。
2.5 細菌內毒素檢查實驗 根據幹擾實驗的結果，選用λ為0.5Eu/ml的鱟試劑進行實驗。取3批RT檢查合格的供試品，用BET水配製成20mg/ml的溶液依細菌內毒素檢查法［1］檢查，結果見表2。從表2的結果看，供試品和陰性對照管均呈陰性，供試品陽性管和陽性對照管均呈陽性，實驗結果成立，3個批號供試品的細菌內毒素均符合規定，與RT法結果一致。
表1 注射用對氨基水楊酸鈉幹擾試驗結果（略）
表2 注射對氨基水楊酸鈉的細菌內毒素檢查結果（略）
3 小結
實驗結果表明，本品對鱟試劑的凝集反應無幹擾作用，用細菌內毒素檢查法來代替家兔法對注射用對氨基水楊酸鈉進行質量控製是可行的，方法是將樣品用BET水配製成20mg/ml的溶液，與靈敏度為0.5Eu/ml或靈敏度更高的鱟試劑反應，結果穩定、可靠。
作者：朱萬政 張美麗 中華醫藥雜誌 2004年3月 第4卷 第3期
參考文獻
1 中國藥典.二部.2000版，附錄.
2 夏振民.藥品細菌內毒素檢查的實驗設計.藥物分析雜誌，1995，15（30）：54.
3 黃清泉，夏振民.藥品的細菌內毒素檢查的實驗設計.中國藥學雜誌，1997，32（2）：72.
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