革蘭陰性杆菌618株的分布及耐藥性監測

【摘要】 目的  了解臨床革蘭陰性杆菌感染分布及耐藥性特征。 方法  收集各類感染標本中分離的618株革蘭陰性杆菌，進行分析，監測其耐藥性。 結果  占前幾位的革蘭陰性杆菌為大腸埃希菌（40.8%）、銅綠假單胞菌（19.4%）、肺炎克雷伯菌（15.5%）、陰溝腸杆菌（19.2%）、熒光假單胞菌（7.8%）等。腸杆菌科的革蘭陰性杆菌對氨苄西林耐藥率較高（68.2%～71.9%）;耐藥率較低的為頭孢曲鬆（0～15%）、氨曲南（13.1%～25%）、頭孢呱酮（5.3%～22.6%）、頭孢他啶（7.1%～21.1%）。假單胞菌屬中，嗜麥芽窄食假單胞菌對監測抗生素廣譜耐藥（25%～100%）。 結論  革蘭陰性杆菌均有較嚴重的耐藥性，應加強耐藥性監測，合理使用抗生素，選用對病原菌耐藥性較低的抗生素治療感染性疾病。

    

　　關鍵詞  革蘭陰性杆菌 耐藥性 微生物 細菌感染

     

　　革蘭陰性杆菌是醫院感染的主要病原菌，是導致感染性休克的重要原因，其中一部分患者因嚴重感染引起諸多並發症或多器官功能衰竭而死亡，為探討本院的感染細菌中革蘭陰性杆菌的分布及耐藥情況，於2002年10月～2004年7月從臨床患者各類標本中分離到618株革蘭陰性杆菌進行分析，現將結果報告如下。

 

　　1 材料與方法

 

　　1.1 材料

   

　　1.1.1 菌株來源 於2002年10月～2004年7月本院住院及門診患者各類標本615份中，分離到618株革蘭陰性杆菌。其中痰245份，血28份，尿103份，膿性分泌物208份，胸腔積液17份，咽拭子8份，其他標本6份。

   

　　1.1.2 試劑及儀器 （1）各種培養基均來源於杭州天和微生物試劑（血平板中脫纖維新鮮兔血由本實驗室采集），參照《全國臨床檢驗操作規程》製備。（2）革蘭陰性菌SEITITR先德藥敏試驗板PRCMBC板、CNIDAP80鑒定板，均購於上海德記行科技發展有限公司。（3）儀器:英國先德全自動熒光快速微生物鑒定/藥敏分析儀。

   

　　1.1.3 標準菌株 大腸埃希菌、銅綠假單胞菌均購自廣東省臨檢中心。

　　1.2 方法

   

　　1.2.1 細菌鑒定 取血平板中3～5個純菌落於4ml滅菌離子水中混勻，使菌液的濁度達到0.5麥氏管，濃度達到1×10 8 cfu/ml，取上述菌懸液加入到GNIDAP80鑒定板中，各孔50μl，在尿素、靛基質二孔中加液體石蠟150μl，覆上透明薄膜。

   

　　1.2.2 藥敏試驗 在11ml肉湯管內加入相應熒光紙片，靜置15min，取濃度1×10 8 cfu/ml菌懸液10μl於上述肉湯管中上下顛倒10次後，加入到PRCMBC藥敏試驗板中各孔50μl，覆上透明薄膜。將GNIDAP80鑒定板、PRCMBC藥敏試驗板，用機器掃描後，放入35℃～37℃SENSITITRE全自動熒光快速微生物鑒定/藥敏分析孵育箱內，18～24h後由Aris讀板。

   

　　1.2.3 統計學方法 用微生物管理係統、浙江鬆苗軟件統計分析。

    

　　2 結果

    

　　618株革蘭陰性杆菌分布見表1。占前幾位的分別為大腸埃希菌252株（40.8%），銅綠假單胞菌120株（19.4%），肺炎克雷伯菌96株（15.5%）等。

   

　　426株腸杆菌屬革蘭陰性杆菌對15種抗生素耐藥率見表2，對氨苄西林耐藥率較多（68.4%～71.9%），耐藥率較低的頭孢曲鬆（0～15%）、頭孢呱酮（5.3%～22.6%）、氨曲南（13.1%～25%）、頭孢他啶（7.1%～21.1%）。

   

　　192株假單胞菌屬革蘭陰性杆菌對11種抗生素耐藥率見表3，嗜麥芽窄食假單胞菌對監測抗生素廣譜耐藥（25%～100%）。

    

　　表1 618株革蘭陰性杆菌的分布（略）

    

　　表2 426株革蘭陰性腸杆菌屬對15種抗生素耐藥率 （略）

    

　　表3 192株革蘭陰性假單胞菌對11種抗生素耐藥率 （略）

    

　　3 討論

    

　　感染的病原菌中，革蘭陰性菌占較大比例，如表1所示，大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、克雷伯菌及陰溝腸杆菌仍是本院的主要病原菌，而且熒光假單胞菌、嗜麥芽窄食假單 胞菌呈上升趨勢。

   

　　三代頭孢菌素對革蘭陰性杆菌治療曾收到很好的效果，但隨之出現了對三代頭孢菌素耐藥菌株，特別是細菌產生ESBLs能水解所有三代頭孢菌素，給臨床治療造成了困難。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌是產生ESBLs的主要細菌，從細菌分布中可見，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌分別占第一、第三位。對氨苄西林耐藥率較高，分別為70.2%，71.9%。對環丙沙星、慶大黴素、頭孢呋辛鈉、頭孢唑啉、呱拉西林耐藥性也較顯著，可能與本院對此類藥物廣泛使用有密切關係。如表2所示:腸杆菌屬的革蘭陰性菌對頭孢曲鬆、頭孢呱酮、阿米卡星較敏感，可作為首選藥物。

   

　　銅綠假單胞菌在本院細菌感染中占第二位，在常用的11種抗生素中，呱拉西林、替卡西林/克拉維酸耐藥率較高（50%以上）。嗜麥芽窄食假單胞菌對所監測的抗生素廣譜耐藥（25%～100%）。假單胞菌屬的革蘭陰性杆菌對第三代頭孢菌素敏感率較高，如頭孢他啶、頭孢呱酮，可作為首選藥物。

   

　　革蘭陰性杆菌中，腸杆菌屬和假單胞菌屬對抗生素敏感性差異較大（參閱表2、表3）。不參考耐藥菌株監測結果，直接使用廣譜抗菌藥物進行治療是不可取的，應建立嚴格的細菌耐藥監測網，有效地防止耐藥菌株在醫院的普遍出現，提高對細菌感染性疾病治療水平［1，2］ 。

   

　　英國先德全自動熒光快速微生物鑒定/藥敏分析儀，操作簡單、結果準確，可鑒定、反映細菌耐藥程度，對於觀察細菌發展趨勢十分必要，試驗結果采用微生物管理係統、浙江鬆苗軟件進行係統分析，能為臨床提供可靠的測試數據。

      作者：李玲  中華現代臨床醫學雜誌 2005年6月 第3卷 第11期作者單位:514500廣東省興寧市人民醫院檢驗科

 

　　參考文獻

    

　　1 戴立人，何支華，劉瑩，等.重症病房革蘭氏陰性杆菌的分布及濃度耐藥監測.中華醫學雜誌，1999，22:77-79.   

　　2 劉振君，邱桂懷，張秀芳，等.527株病原菌的種類及藥物敏感試驗經驗性.中華醫院感染雜誌，1999，7:114-115.