空氣中優勢真菌與兒童過敏性哮喘關係的研究

關鍵詞：真菌；哮喘；兒童；免疫療法

　　【摘要】　目的　研究氣傳真菌與嬰幼兒和兒童過敏性哮喘關係，及免疫治療的療效。方法　采用空氣中曝片調查法和曝皿調查法，觀察氣傳真菌的品種和數量；對住院的345例哮喘患兒進行過敏原皮試；對真菌變應原皮試陽性病例進行免疫治療。結果　經1年的調查，曝片觀察到的35 746個真菌孢子和曝皿觀察到的1 188個菌落，分屬於4個亞門60個種屬，常見菌種有黑粉菌、交鏈孢菌、鏽菌、枝孢芽枝菌、芽枝菌、皮思菌、大孢枝孢菌、黑曲菌、雜曲菌和煙曲菌。85例嬰幼兒哮喘患兒，39例真菌變應原皮內試驗陽性（45.9％），260例兒童哮喘患兒，108例皮試陽性（41.5％），總陽性率42.6％。陽性率與真菌數量無關。真菌過敏性哮喘患兒的發病無明顯季節特征。108例兒童哮喘中的81例堅持免疫治療，總有效率為88.9％。結論　氣傳真菌是小兒哮喘的重要致敏原；免疫治療有一定療效。

　　The relationship between airborne fungi and allergic asthma in children　 Dong Zongqi, Yu Chuntao, Shao Yuelan, et al. Wuhan Children′s Hospital, Wuhan 430016

　　【Abstract】　Objective　To study the relationship between the airborne fungi and allergic asthma in children.Methods　Airborne fungi were isolated and identified by using gravitational precipitation method (sheet glass and culture plate of exposure) determination. Fungal allergen skin tests were performed on 345 children with bronchial asthma. Fungal immunotherapy was given to children who showed positive results on the skin tests.Results　Observation of 35 746 grain of airborne fungi spores and 1 188 grain of fungi spores for one year revealed the following species of fungi: Ustilaginales, Aternaria, Uredinales, Clodoporium cladosporioides, Cladosporium, Pithomyces, Cladosporium macrocarpum, Aspergillus niger, Aspergillus versicolor and Aspergillus fumigatus. Thirth-nine of 85 infants and young children with asthma (45.9%) showed positive skin test and 108 of 260 older children with asthma (41.5%) were positive for the skin tests; total positive rate was 42.61%. Eighty-one in 108 cases of asthma completed fungal immunotherapy. Total effective rate was 88.9%.Conclusion　The airborne fungi are important sensitization allergen for inducing asthma in children. Fungal immunotherapy is an effective method for treatment of asthma associated with fungi.

　　【Key words】　Fungi　　Asthma　　Child　　Immunotherapy

　　過敏性哮喘的誘發因素主要是空氣中的致敏原，其中氣傳真菌占有一定地位。掌握一個地區空氣中致敏真菌的品種、優勢菌種及其傳播規律，對於研究兒童真菌過敏性哮喘的患病情況，針對過敏原進行免疫治療，有重要的實用價值。我們對本地區氣傳致敏真菌的品種及其所引起的嬰幼兒和兒童過敏性哮喘以及免疫治療的療效進行了觀察，現將結果報告如下。

　　一、氣傳致敏真菌的調查

　　按全國統一的空氣中曝片和曝皿調查法^［1］。(1)空氣中曝片調查法：將采樣器置於三樓平台上，用潔淨的25mm×75mm載玻片，在玻片中塗抹一層薄而均勻的透明軟性凡士林粘附劑，每日上午10時將載玻片置於采樣器中，24小時後取片，日複一日。取回玻片後，先將甘油瓊脂微火熔化，待微熱後立即滴在載玻片上，加蓋22mm×22mm蓋玻片，在顯微鏡下鑒定菌種並計數。(2)空氣中曝皿調查法：采用10cm普通營養瓊脂平皿，每月曝露室內、外各3個平皿,每次在空氣中暴露4分鍾,然後置室溫或25℃恒溫箱內培養，觀察菌落並作單菌種鑒定。

　　二、哮喘患兒真菌過敏情況調查

　　調查345例住院哮喘患兒中的真菌過敏者。345例的診斷均符合嬰幼兒哮喘和兒童哮喘診斷標準^［2］，其中有嬰幼兒哮喘85例和兒童哮喘260例。按照皮膚過敏原皮試操作常規^［3］，對患兒進行多價和單價真菌變應原皮內試驗，並用不含藥物的稀釋液作對照試驗，按標準判讀結果。真菌變應原浸液由北京協和醫院提供。

表1　武漢地區氣傳致敏真菌(部分)的分布（曝片法）

　　 表2　武漢地區氣傳致敏真菌(部分)的分布(曝皿法)

　　三、免疫治療^［3］

　　對真菌過敏的哮喘患兒按常規進行免疫治療，並進行療效觀察。療效判斷標準見本刊兒童哮喘防治常規(試行)。

結果

　　一、氣傳致敏真菌調查結果

　　經1年的調查（1997年1月1日～1997年12月31日），曝片中共觀察到35 746個真菌孢子，分別屬於：子囊菌亞門15個屬種627個；擔子菌亞門2個科目18 168個；半知菌亞門25個屬種16 920個。曝皿中觀察到真菌1 188個，其中接合菌亞門3個屬種133個菌落；半知菌亞門15個屬種797個菌落。真菌和孢子合計60個品種（表1，2），其中按計數的多少，將5%～35%占有率的真菌視為優勢菌，小於5%者為非優勢菌，優勢菌中按數量由多到少依次排序為黑粉菌、交鏈孢菌、鏽菌、枝孢芽枝菌、芽枝菌、皮思菌、大孢枝孢菌、黑曲菌、雜曲菌和煙曲菌。非優勢菌不一一列舉，其中小竇氏菌和梨黑星菌是迄今為止國內罕見的。各類真菌的月分布情況大致為5～6月和10月為相對高峰期，其他月份都有一定數量真菌生長。

　　二、哮喘患兒真菌變應原皮試結果

　　哮喘嬰幼兒85例中，有39例患兒對真菌過敏（45.9%），兒童哮喘260例中對真菌過敏者108例（41.5%），兩組比較經卡方檢驗，χ²＝0.494,P＞0.05。用優勢菌種和非優勢菌種作抗原，分別給哮喘患兒作皮試，結果是，嬰幼兒哮喘患兒中對優勢菌過敏者31例次（36.5%），對非優勢菌過敏者27例次（31.8%），兩者比較χ²＝0.419,P＞0.05。兒童哮喘患兒對優勢菌過敏者82例次(31.5%），對非優勢菌過敏者68例次（26.2%），二者比較χ²＝1.84,P＞0.05。345例中的147例真菌過敏性哮喘患兒的發病季節和月分布差異無顯著意義。過敏患兒均對多價真菌過敏，無一例對單一真菌過敏者。

　　三、免疫療法的治療結果

　　兒童真菌過敏性哮喘108例中的81例接受1年以上的免疫治療(治療組)，其中臨床控製20例（24.7%），顯效23例（28.4%），好轉29例（35.8%），總有效率88.9%；27例未接受免疫治療，仍堅持常規吸入藥物治療(對照組)，其中臨床控製2例（7.4%），顯效3例（11.1%），好轉5例（18.5％），總有效率37.0%,兩組比較χ²＝29.79，P＜0.001，差異有顯著意義。

討論

　　1年來采用曝片和曝皿法觀察到氣傳真菌35 746個孢子和1 188個菌落，平均每天能觀察到101個真菌。除了極少數尚不能鑒定的真菌外，它們分屬於半知菌亞門、擔子菌亞門、子囊菌亞門和接合菌亞門等四個亞門的60個種屬細菌。常見的菌種有黑粉菌、交連孢菌、鏽菌、枝孢芽枝菌、芽枝菌、皮思菌、大孢枝孢菌、黑曲菌、雜曲菌和煙曲菌等10種。1年中的5、6月和10月為相對高峰期，但其季節性不如氣傳花粉明顯。陰晴雨雪、風霜雲霧、氣壓高低、日照時間長短等對真菌的生長有一定影響，但真菌孢子終年不斷。通過氣傳致敏真菌的調查有助於了解本地區空氣中真菌的含量與品種，對推斷或監測人群中真菌變態反應的發病情況與發展趨勢有非常重要的意義。對及時明確病因進行有效防治，避免成為終生痼疾，有實際應用價值。

　　對於真菌過敏性哮喘的診斷，已經有一些較可靠的輔助診斷方法^［4，5］，但至今尚不能在國內普及應用。我們采用混合多價或單價真菌變應原浸液作皮內試驗，患兒出現明顯的陽性反應後，再為患兒作進一步的各種不同真菌變應原的分類皮內試驗，結果提示，嬰幼兒哮喘85例中39例對真菌過敏(45.9％)，兒童哮喘260例中108例過敏(41.5％)。說明真菌與真菌過敏性哮喘的關係是明確的^［6］。用優勢真菌和非優勢真菌分別為患兒作皮試，在陽性率方麵未能證明它們之間有明顯區別。其發病季節的分布亦不如氣傳花粉致敏病例那樣四季分明。皮試陽性病例中無一例對單一真菌陽性者，說明具有變態反應體質的兒童不僅對某一種真菌過敏，同時說明某些不同種屬的真菌變應原之間存在著交叉抗原性^［7］。

　　過敏原免疫治療是通過反複地給有IgE介導的過敏患者投用某種特定的抗原，以達到當患者自然暴露在抗原時不再發生過敏症狀和炎症反應^［8］。對真菌過敏性哮喘患兒，給予皮內注射多價真菌變應原浸液，觀察哮喘臨床症狀的改善程度或多長時間不發作哮喘，作為監測免疫療法是否有效，是比較方便實用的方法^［9］。堅持1年以上的免疫治療，對真菌過敏性哮喘患兒具有一定療效，總有效率為88.9%，與對照組比較差異有顯著意義(P＜0.001)。有報道在注射免疫治療中全身係統反應的發生率為2‰^［10］，本組病例中無一例發生不良反應。

　　作者：董宗祈 餘春濤 邵月蘭 肖詩豹 黃靜寧 楊黎 周華 徐俊 鍾木香《中華兒科雜誌》

　　參考文獻

　　1　葉世泰，喬秉善，主編. 中國氣傳致敏真菌調查. 北京：科學出版社，1995.12-14.

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　　9　 Costa T,Placido L,Silva M,et al.Effects of immunotherapy on symptoms,PEFR,Spirometry,and airway responsiveness in patients with allergic asthma to housedust mites (D.pteronyssinus)on inhaled steroid therapy. Allergy, 1996, 51:238.

　　10　 Parke JW,Engler RI,Smith LI.Immunotherapy reactions to aeroallergen and venom immunotherapy.J Allergy Clin Immnol,1990,85:214.