實驗室生物安全級別——生物安全三級

BSL—3應用於臨床、診斷、教學、研究、或者生產設施，在該級別中開展有關內源性和外源性病源的工作，若因暴露而吸入該病源。會引發嚴重的、可能致死的疾病。實驗人員應在處理致病性的和可能使人致死的病源方麵受過專業訓練，並由對該病源工作有經驗的、有資格的科學工作者監督。

所有與傳染源操作有關的步驟，都在生物安全櫃或其他物理遏製裝置中進行，或由穿戴合適防護服及設施的實驗人員進行。實驗室經過特殊設計和施工。

然而，應該認識到現有有些設施，不一定滿足BSL-3的所有要求(即，雙門進入工作區和密封問題)。在這種情況下，在BSL—2設施中開展常規操作(如，診斷程序中用於鑒定；分型、敏感性測試的病源繁殖)，其安全級別也可接受，但還需做到1)將實驗室內廢氣排出室外；2)實驗室的通風經過平衡以向室內提供定向氣流；3)工作時，禁止進入實驗室；4)嚴格遵照或使用BSL—3中推薦的標準微生物操作、特殊操作和安全設備。隻有實驗室主任可作出對BSL—3推薦的修訂方法進行補充的決定。

以下的標準和特殊安全操作、設備及設施和BSL—3病源有關：

一、標準微生物操作

1、實驗時，由實驗室主任決定限製或禁止進入實驗室。

2、接觸傳染源的人員在離開實驗室取下手套後，要洗手。

3、實驗室內嚴禁飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。實驗室內戴隱型眼鏡的人，也要戴眼鏡和麵罩。食品要存放在工作區外專用的櫥櫃和冰箱中。

4、不能用嘴移液，隻能用機械裝置移液。

5、製定銳器安全使用規範。

6、所有的操作過程應盡量細心，避免產生氣溶膠。

7、至少每天一次、或有活體灑出時，對工作台麵進行消毒。

8、所有的培養物、儲存物及其它規定的廢物在釋放前，均應使用可行的消毒方法進行消毒，如高壓滅菌。轉移到就近實驗室消毒的物料應置於耐用、防漏容器內，密封運出實驗室。來自BSL—3實驗室的傳染性廢物轉移至他處釋放前應消毒。

9、實施控製昆蟲和齲齒動物的程序。

二、特殊操作

1、實驗時，關閉實驗室的門。

2、實驗室主任對進入實驗室進行控製，限製項目有關人員及輔助人員進入。一般情況下，易感人員或感染後會出現嚴重後果的人員，不允許進入實驗室或動物房，例如，患有免疫缺陷或免疫抑製的人，其被感染的危險性增加。實驗室主任對每種情況的估計和決定誰能進入實驗室或動物房工作，負有最終責任。未成年人不得進入實驗室。

3、實驗室主任應製定規章和程序，隻有告知潛在風險並符合進入實驗室特殊要求(如，經過免疫接種)、遵守進出程序的人，才能進入實驗室和動物房。

4、當實驗室或遏製設施中有傳染源和感染動物時，所有實驗室和動物房入口處，應貼有危險警告標誌和常用的生物危險符號，並顯示以下信息：有關病源、實驗室主任和有關責任人的姓名和電話表、進入實驗室的特別要求(如，必須免疫、戴口罩、或采取其他的個人防護措施)。

5、實驗室人員接受適當的、和實驗室中處理或將要處理的病源有關的免疫接種或測試(如，乙肝免疫接種或TB皮試)，並建議根據所處理的病源定期進行皮試。

6、適當時，收集和儲存適合於所有實驗室人員和其他有風險人員使用的基本血清樣品。根據所處理病源或實驗室的功能，應定期收集其他血清樣品。

7、實驗室主任應製定實驗室專用生物安全手冊，標準操作程序中要包括生物安全預防措施。要告知實驗人員特殊風險，實驗人員要閱讀，並在操作和程序中遵照執行。

8、實驗人員及其輔助人員應接受適當的培訓，包括和工作有關的可能存在的風險、防止暴露的必要措施和暴露評估程序。當程序必需改變時，有關人員必須每年更新知識，接受附加培訓。

9、實驗室主任有責任確保在涉及BSL—3的微生物工作開展之前，所有人員熟練掌握標準微生物操作及技能，熟練掌握特殊實驗室設施的操作和運行，其中可能包括人致病菌或細胞培養物處理的重要技術，或由實驗室主任或其他熟悉於微生物安全操作及技能的、稱職的科研工作者提供的特殊培訓課程。

10、必須經常對所有汙染的銳器采取高度預防措施，包括針頭和注射器、玻片、移液管、毛細管和手術刀。

a．針和注射器或其他銳器應限製在實驗室內，類似灌腸、靜

脈切開放血、或實驗動物液體吸出等，可以用其他器具的，就不要用銳器。可能時，用塑料器具代替玻璃器具。

b．注射和吸取感染材料時，隻能使用針頭固定注射器或一次性注射器(即注射器和針頭是一體的)。用過的一次性針頭必須彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉，或在丟棄前進行人工處理，要不將之小心放入不會被刺穿的、用於收集廢棄銳器的容器中。非一次性銳器必須放置在堅壁容器中，轉移至處理區消毒，最好高壓殺菌。

c．適當時，使用帶針頭套的注射器、無針頭的係統和其他安全設施。

d．打碎的玻璃器皿不能直接用手處理，必須用其它工具處理，如刷子和簸箕、夾子或鑷子。盛汙染的針頭、銳器、碎玻璃的容器在到掉前，應按照地方、州、聯邦的規定進行消毒。

11、所有與傳染源有關的開放操作，都應在遏製設施內的生物安全櫃或其他物理遏製設備中進行。不許在開放的實驗台上、並在開放的設施中開展工作。用背麵為塑料質地的紙擦拭生物安全櫃內的無孔台麵，便於清潔。

12、按日常程序、在有關傳染源的工作結束後、尤其是傳染源灑出或濺出後、或受到其他傳染源汙染後，實驗室設備和工作台麵應當使用有效的消毒劑消毒。

a．灑出的傳染源需由專業人員、或由經過適當培訓且配有裝備的處理高濃度傳染源的人員進行消毒、處理、清洗。製定並公布可能造成濺灑的實驗程序。

b．汙染的設備，在離開設施送去修理、維護或打包運輸前，要按照地方、州或聯邦的規定消毒。

13、培養物、組織，體液標本，或具有潛在傳染性的廢物要放入容器中，以防在收集、處理、儲存、運輸或裝卸過程中泄露。

14、實驗室裏所有可能被汙染的廢棄物品(如：手套、實驗室外套等)，在丟棄或重新使用之前，必須經過消毒。15、灑漏或偶然事件中，明顯或可能暴露於傳染源時，要立即向實驗室主任報告。進行適當的醫學評估、觀察、治療，保留書麵記錄。

三、安全設備(第一道屏障)

l、進入實驗室時，要穿上實驗防護服，如，前襟一體或後係式大褂、幹淨的外套或連褲服。不得在實驗室外穿防護服。重複使用的衣服在清洗前要消毒，衣服被明顯汙染後應更換。

2、在處理傳染源、感染動物及被汙染的儀器時，必須戴手套。

3、建議經常更換手套和洗手，一次性手套不能重複使用。

4、有關傳染源的所有操作、感染動物的驗屍、從感染動物或胚胎卵采集組織或液體等，都應在II級或III級生物安全櫃中進行。

5、當操作不能在生物安全櫃中進行時，應適當的綜合使用個人防護設施(如，口罩，麵罩等)和物理遏製設施(如：帶安全罩或密封轉頭的離心機)。

6、當進入內有感染動物的房間時，應采取呼吸和麵部保護措施。

四、實驗室設施(第二道屏障)

1、實驗室要離開建築物內的行走區，禁止隨便進入實驗室。進入走道後，至少需要經過兩道自動門，才能進入實驗室。所有的門都應有鎖。過道裏可以設計一個更衣室。

2、每個實驗室有一個洗手池，洗手池的操作應該是免接觸式或全自動的，洗手池應安裝在門口附近。

3、處理BSL—3病源的區域，牆麵、地麵、天花板應易於清洗、消毒；若有接縫，應密封；表麵應光滑防水；對實驗室常用化學試劑和消毒劑具有耐腐蝕性。地板應整體、防滑，建議在地板凹處使用掩蔽罩。牆麵、地麵、天花板都不應留有縫隙，或在設施消毒時能夠密封。

4、實驗台表麵應能防水、耐熱、耐有機溶劑、耐酸堿和用於工作台麵及設施消毒的其他化學物質。

5、實驗室的操作台應能承受預期的重量。實驗台、安全櫃以及設備間的空間便於打掃。實驗室使用的椅子及其它器具，應覆蓋易於清洗的非織物。

6、所有的窗門必須關閉和密封。

7、有實驗垃圾處理設施及其使用方法，該設施最好設在實驗室內(即，高壓鍋、化學消毒劑、焚燒爐、其他可行的消毒方法)。應有消毒設備使用方法。若垃圾運出實驗室，應適當密封，並不應通過公共通道運送。

8、應配置生物安全櫃，安全櫃放置地點應遠離門、房間通風百葉窗、實驗室內行走區。

9、應有管道化的排氣係統，該係統進入實驗室的風向應從“潔淨區”到“汙染區”。排出的空氣不再循環至建築物內的任何其他區域。排出的空氣不需要過濾或作其他處理，但也要依所處場所的要求、特殊病源操作、使用條件而定。外部排氣口要遠離有人區、進風口，否則需經過HEPA過濾。實驗人員必須證實進入實驗室的風向是正確的。建議在實驗室的入口處設置可視的監視裝置，表明和證實進風的風向。要考慮安裝HVAC控製係統。防止實驗室持續正向增壓。應安裝聲音報警裝置，警告實驗人員HVAC係統出了問題。

10、若生物安全櫃至少每年經過測試和確證，則二級生物安全櫃排出的、經過HEPA過濾的空氣，可進入實驗室循環。當二級生物安全櫃通過建築物排氣係統排出空氣時，安全櫃的排氣管路的連結，應避免對安全櫃的空氣平衡或建築物排氣係統的空氣平衡產生幹擾(如，在安全櫃排氣管和排氣管道間形成空氣隙)。當使用三級生物安全櫃時，要和排氣係統直接連結。若三級安全櫃和供氣係統相連，應避免安全櫃正向增壓。

11、會產生氣溶膠的連續流離心機及其他設備應在一個裝置中，該裝置通過HEPA過濾器排出空氣，而避免直接排入實驗室中。至少每年測試HEPA係統。另外，當遠離有人區或進風口時，該設備排出的空氣可以排到外麵。

12、真空管路由液體消毒劑汽水閥和HEPA過濾器及類似設備保護。需要時，要更換過濾器。另外，可以使用手提真空泵(也需要由汽水閥和過濾器正確保護)。

13、實驗室內應有眼睛衝洗裝置。

14、光線適宜於開展所有的工作，避免反光和閃光，以免妨礙視覺。

15、BSL—3設施的設計和操作程序必須文件化。設施必須經過測試以確證設計和操作參數在係統運轉前已達到要求。因操作經驗，會修改操作程序，所以設施必須反複測試，每年至少一次。

16、若有關病源陳述(根據風險分析、場所條件、其他有關聯邦/州／地方法規而定)中要求，則應采取其他環境保護措施(如，實驗人員淋浴、排出空氣的HEPA過濾、其他管道設施的遏製處理、液體消毒劑的供應)。