紅掌,是天南星科花燭屬多年生常綠植物,葉革質光亮,單花頂生,花期長達1個半月左右。利用常規播種、分株法繁殖切花紅掌,繁殖率極低,播種繁殖所需時間長,且易產生變異。利用組織培養快速繁殖切花紅掌,可滿足市場的大量需求。
材料與方法
材料來源為河南濮陽世錦公司自行選育的優質紅掌切花品種。
外植體滅菌處理取切花紅掌的幼嫩葉片及葉柄作為供試材料,首先在流水下衝洗1小時,同時用毛刷輕輕刷洗,在消毒前先將葉片切成1.5cm×1.5cm左右的小片,將葉柄切成1.5cm左右長的小段,將其放入滅過菌的廣口瓶中,用75%酒精浸泡30秒後,再用0.1%HgCl2浸泡消毒8分鍾,用無菌水衝洗5次,在無菌紙上把葉片切成1cm×1cm左右的小片,葉柄切成1cm左右的小段,接種在滅過菌的培養基上,所有無菌操作必須在超淨工作台內進行。
培養基及培養條件基本培養基為MS加蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,pH值5.8。在不同培養階段添加不同種類和濃度的植物生長調節劑,培養溫度為25℃±1℃,光照強度2000~3000lux,每日光照14小時。
結果與分析
不同外植體脫分化程度比較將2種不同外植體分別接種於MS+6-BA1.5+NAA0.7的同一培養基上,培養3周後,葉片外植體首先明顯膨大,長出愈傷組織塊,5周後,葉片外植體都長出了愈傷組織塊。觀察發現2種不同外植體都能被誘導出愈傷組織,隻是葉片較容易被脫分化。
6-BA對愈傷組織誘導的影響將消過毒的葉片接種於加有不同濃度6-BA的MS+6-BA+NAA0.7的培養基上進行培養,觀察不同濃度6-BA對葉片外植體愈傷組織誘導的影響。由表2可看出,不同濃度的6-BA對切花紅掌葉片的誘導有明顯不同。在無6-BA的培養基上,不能誘導出愈傷組織。當6-BA濃度低於1.5mg/L時,隨著6-BA濃度的增大,愈傷組織誘導率及增殖率都隨之增大;而較高濃度的6-BA又抑製了愈傷組織的誘導及增殖。當6-BA為1.5mg/L時,愈傷組織誘導率及增殖率都達到最大,效果最好。因此MS+6-BA1.5+NAA0.7對切花紅掌是較理想的誘導培養基。6-BA對愈傷組織分化增殖的影響將誘導成功的愈傷組織塊分別轉接到含不同濃度6-BA的分化培養基上進行分化培養,觀察不同濃度外源激素6-BA對愈傷組織分化產芽的影響。
由表3可見,不同濃度的6-BA對切花紅掌愈傷組織的分化具有明顯不同的效應。隨著低濃度6-BA濃度的增大,芽的分化率及產芽量都隨之增大。當6-BA達1.0mg/L以上時,明顯抑製了芽的分化,加速了愈傷組織的生長;當6-BA為0.5mg/L時,芽分化率達最高為91.43%,芽的生長速度也最快。將布滿叢芽的愈傷組織切成小塊,進行繼代培養,每30天繼代一次,可達到工廠化生產的目的。
生根培養從叢芽中切取2~3cm長的單芽接種於生根培養基中,經過15天的培養,觀察其在不同培養基中的生長情況。
由表4可看出,NAA和IBA0.2mg/L對切花紅掌生根都有很好的促進作用。前者根的形態為粗短,後者為細長,但NAA價格較IBA低,所以1/2MS+NAA0.2mg/L作為切花紅掌的生根培養基的首選。
試管苗移栽取生根良好的試管苗,用水把苗基部的培養基清洗幹淨,栽入草炭與珍珠岩1∶1的基質中,澆透水,放到遮蔭的溫棚內,溫度保持在18℃~25℃之間,保持周圍濕度90%左右,經過精心管理,2周後,試管苗移栽成活率一般可達90%。經過多次移栽試驗發現,保持小苗周圍空氣濕潤,通氣良好且保濕良好的栽培基質以及適宜的溫度是切花紅掌試管苗移栽成功的關鍵。
討論
在切花紅掌的組織培養過程中,首先誘導產生優質愈傷組織,分化出芽點多的優良無性係作為快繁材料,這樣就能在短時間內生產大量優質種苗。
從培養基移栽入土,是從異養到自養的轉變。試管異養條件是在無菌、高濕、低光照、溫度穩定的環境中生長,而溫室是相對幹燥、強光、溫差大的環境,因此,在試管苗移栽馴化期,要根據切花紅掌的生理特點及試管苗特點選擇透氣、保溫好、適合切花紅掌生長的移栽基質,要保證適宜的溫度和濕度,創造良好的生長環境,減少病蟲害,提高移栽成活率。
眾所周知,高濃度的細胞分裂素會造成植株的不可預知變異,在上述組培快繁技術中所用分裂素濃度雖未引起明顯變異,但濃度大小一定要合適。
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