摘要:在大花蕙蘭組培快繁過程中,植物激素對原球莖的誘導、增殖及幼苗的分化有顯著影響。細胞分裂素6-BA和生長素N從最佳配比對大花蕙蘭組織培養很重要,尤其是細胞分裂素影響較大。
關鍵詞:大花蕙蘭;組織培養;植物激素
大花蕙蘭(Cymbidium)是蘭科蘭屬中一部分大花附生種及其雜交種的統稱,屬複莖地生蘭或半附生蘭,原產地在喜馬拉雅山脈及東南亞高山上,是世界五大重要商品蘭花之一,近幾年在我國花卉市場上流行的高檔室內盆栽花卉,具有極高的觀賞價值,株型高大雄偉,花大而多,色彩鮮豔。由於大花蕙蘭多為雜交種,種子繁殖無法保持其品質特性,其結實率也相當低,分株能力弱,因而繁殖係數低,繁殖速度慢,遠遠不能滿足商品化生產的需求,而采用組織培養方法進行原球莖增殖可以達到工廠化生產目的。試驗研究植物激素對大花蕙蘭組織培養快速繁殖的影響,並成功地建立了快繁體係,可以用於工廠化育苗。
1材料與方法
1.1材料
大花蕙蘭采自河南農業大學蘭花園中FN4品種,切取健康飽滿10~15cm長的芽,剝去外部葉片直到5mm大小,消毒處理後作為外植體誘導材料。
1.2植物激素對原球莖誘導的影響
以MS為基本培養基,6-BA設0.5、1.0、1.5、2.0mg/L(單位下同)4個濃度水平,NAA濃度為0.2mg/L,培養基均附加香蕉汁100g/L,活性炭0.5g/L,每處理接10瓶,每瓶接1個莖尖,培養30d後,調查原球莖誘導率。
1.3植物激素對原球莖增殖及幼苗分化的影響
將誘導的原球莖分別接種於下列不同培養基中:①MS+6-BA1.0+NAA0.1;②MS+6-BA1.0+NAA0.5;③MS+6-BA1.5+NAA0.1;④MS+6-BAl.5+NAA0.5;⑤MS+6-BA2.0+NAA0.1;⑥MS+6-BA2.0+NAA0.5,以上培養基均加入香蕉汁130g/L,活性炭1.0g/L。每瓶接種10個原球莖,每處理10瓶,培養40d後,調查增殖係數及成苗數。
1.4植物激素對幼苗生根的影響
將原球莖增殖及幼苗分化培養中高於2cm的幼苗切出,轉接到下列生根壯苗培養中:①1/2MS+6-BA0.1+NAA0.5;②1/2MS+6-BA0.3+NAA0.5;③1/2MS+6-BA0.5+NAA0.5;④1/2MS+6-BA1.0+NAA0.5,每種培養基均附加香蕉汁150g/L,活性炭1.5g/L。每瓶接20個幼苗,每處理10瓶,30d後統計生根率及生長情況。以上MS培養基中白糖濃度為30g/L,1/2MS培養中的白糖濃度為20g/L,瓊脂為7g/L,pH值為5.3。培養條件:溫度為24~26℃,光照強度為1000~1800lx,光照時間12~14h/d。
2結果與分析
2.1植物激素配比對原球莖誘導的影響
從表l可以看出,隨著6-BA濃度的增大,原球莖誘導率逐步增高,在6-BA1.5時達到最大,6-BA濃度再增大,原球莖誘導率下降,生長中發現細胞分裂素低濃度形成原球莖慢,並且誘導出原球莖數目少,高濃度形成愈傷多,原球莖少。在培養基MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+香蕉汁100g/L+活性炭0.5g/L原球莖誘導率達到90%,並且每個莖尖分化出4~5個原球莖。
2.2植物激素對原球莖增殖及幼苗分化的影響
大花蕙蘭原球莖在增殖的過程中有幼苗的分化,長時間不轉接,會形成很多苗,因此增殖與幼苗分化同時進行。合理的激素配比會達到理想增殖與成苗。從表2可以看出,隨著細胞分裂素的增大,原球莖增殖係數也增大,但幼苗分化數卻隨著降低,綜合考慮增殖與成苗,培養基④最好,因此最佳增殖及幼苗分化培養基是MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L+香蕉汁130g/L+活性炭1.0g/L。
2.3植物激素對幼苗生根的影響
幼苗接在4種不同的生根培養基上均能生根,隨著細胞分裂素濃度的增大,生根率逐漸降低,說明細胞分裂素對生根有一定的促進作用,但濃度加大引起增殖影響生根,培養基①生根率高,生根條數多,苗長得好。故生根壯苗最佳培養基是1/2MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L+香蕉汁150g/L+活性炭1.5g/L。
3小結與討論
植物激素中的細胞分裂素6-BA和生長素NAA對大花蕙蘭FN4組織培養快速繁殖影響很大。原球莖最佳誘導培養基是MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+香蕉汁100g/L+白糖30g/L+活性炭0.5g/L+瓊脂7.0g/L,原球莖誘導係數可達到4~5。原球莖增殖及幼苗分化培養基是MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L+香蕉汁130g/L+活性炭1.0g/L+白糖30g/L十瓊脂7.0g/L,探索最佳增殖與幼苗分化培養基中激素配比對大花蕙蘭FN4工廠化育苗有很大意義。生根壯苗培養基1/2MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L+香蕉汁150g/L+活性炭1.5g/L+白糖20g/L+瓊脂7.0g/L。
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