紅葉石楠組培技術

      組織培養已成為當前農林種苗生產中的一種重要的繁殖手段，與常規的無性繁殖方法相比，它具有繁殖速度快、周年生產、產品一致性好等優點，尤其在繁殖一些種源稀缺的品種時，更能體現它的優勢。紅葉石楠是近年從國外引進的一個國際新品種，組織培養可以分以下幾個步驟進行：外植體的取得→初代培養（無菌係的建立）→繼代培養（增殖培養）→生根培養→煉苗及過渡移栽→移植到大田。

 

　　外植體的取得

　　選擇紅葉石楠的莖尖和莖段作為組培用的外植體。在取得紅葉石楠母株後，先置於溫室內培養2周左右，期間注意不灑葉麵水，每隔3－5天噴施一次殺菌劑，可有效降低初代培養時的汙染率。在實際操作中，選取嫩枝先端未木質化和半木質化部分，剪成長10cm左右的單芽，莖段部分去葉留2mm左右葉柄，莖尖部分可保留半張小葉，以飽和洗衣粉溶液浸泡3分鍾，用清水衝洗後備用。

 

　　初代培養

　　清洗後的外植體在接種前需進行消毒處理，在超淨工作台上用75％酒精浸泡10秒鍾，再轉入0.15％升汞溶液中滅菌8分鍾，倒去滅菌液，用事先準備好的無菌水衝洗4－5次，瀝幹水後，即可將帶腋芽的莖段或莖尖以生態學下端朝下，垂直接種到初代培養基上，以每瓶培養基接種一個外植體為宜。經過多次試驗，初代培養基以1/2MS+蔗糖30g＋瓊脂7g＋2.0BA+0.2IBA為最佳，pH值5.5－5.8，培養室溫度控製在25℃－30℃之間，光照12小時。接種後一周左右腋芽開始萌動，30－40天可伸長到2cm左右，即可切下進入下一階段的繼代（增殖）培養。

 

　　繼代培養（增殖培養）

　　一般第一次繼代時增殖率較低，經2－3次繼代後增殖數可達5倍左右。繼代培養基可用MS+1.0BA+0.1IBA，pH值5.5－5.8之間，每日光照12小時。無根的試管苗經30－40天培養達到3cm左右時，即可切割以擴大繁殖。當繼代苗達到一定數量後，可以進行生根培養。

 

　　生根培養

　　當紅葉石楠無根苗長到高2cm左右時，可轉移到生根培養基上培養。生根培養基可用1/2MS+0.2-0.3NAA，一般經一周左右可見紅色根生成，30－40天後根長1－3cm，即可進行煉苗反馴化，準備移栽。

 

　　煉苗及過渡移栽

　　紅葉石楠組培苗移栽可省略瓶內煉苗過程，如能在溫室中擰鬆瓶蓋放置3－5天煉苗則更好，但要注意溫度應控製在20℃－30℃之間。過渡移栽是整個組培過程中最為關鍵的一步，如失敗，則前功盡棄。因此移栽前要準備充分，如能在早春和秋冬季移栽在溫床上效果最佳。在實際操作中，應根據不同地區的氣候特點而有所區別。在江浙一帶，過渡苗床可建在普通單體塑料大棚內，床寬1.2m左右，床四周用磚砌高30cm，床底整平，有條件的可加鋪地熱加溫線，上鋪15－25cm的移栽基質，基質以蛭石∶珍珠岩∶泥炭＝1∶1∶1為好。

　　組培苗是在無菌條件下繁育的，在移栽過程中對外界環境需要一個漸進的適應過程，因此需要對過渡苗床進行較為嚴格的消毒處理。實踐中我們使用1000倍敵克鬆溶液澆透整個苗床基質，再用0.15％高錳酸鉀溶液噴灑苗床表麵及四周，24小時後即可移栽小苗。也可用800倍福爾馬林噴灑苗床表麵，用塑料薄膜密封24小時以上，再通風12小時，即可使用。

　　幼苗從瓶內取出後，用清水將根部的瓊脂等洗淨，同時應注意盡量減少根部損傷。種入苗床後，澆灌時盡可能選擇清潔的水源，移栽當天噴施1/4－1/2MS營養液，並噴施800－1000倍甲基托布津或1000倍多菌靈藥液，以後每隔一周噴施一次，需連續噴施3－4次，移栽初期需特別注意保持苗床和空氣濕度，一般需全封閉管理一周左右，再半封閉一周左右，根據天氣情況在25天左右可逐步通風，除去覆蓋物。在春秋季節移栽時，需遮蔭三周左右，冬季遮蔭二周左右即可。同時應注意控製苗床溫度在15℃－30℃之間才利於成活，如環境溫度超過35℃，則不宜移栽。一般過渡移栽50天後，小苗就可上盆移栽，春季就可移入大田。

 

　　大田移栽

　　大田移栽的時機應根據小苗生長情況和天氣情況確定。一般小苗長至5cm以上移栽就可以保證95％以上成活率，如在10cm以上移栽則效果更好。大田移栽後期管理與其他方法繁殖的小苗一樣操作即可。

 

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