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致病性大腸埃希氏菌及其檢驗(1)



錄入時間:2011-3-24 10:25:27 來源:食品夥伴網

 

致病性大腸埃希氏菌是指能使人、動物(尤其是嬰兒和幼齡動物)感染及人食物中毒的一群大腸杆菌。

在自然界中本菌分布廣泛,主要寄居場所是人和其它溫血動物的腸道中,是一類條件性致病菌。致病性大腸埃希氏菌的形態特點、培養特性和生化特性均與非致病性大腸埃希氏菌非常相似,以至難以區分,隻能通過血清學的方法,從抗原結構的差異來區別。在致病性大腸埃希氏菌中,有些血清型能夠引起人的食物中毒,有些血清型能夠引起人的腸道內外感染。還有一些血清型的菌株能夠使畜禽發病,危害畜牧業,降低畜產食品的質量。致病性大腸埃希氏菌可從飲用水,未消毒牛乳,病畜髒器、禽類及其人畜糞便汙染的各種食品中分離出來。

致病性大腸埃希氏菌屬主要分為五大類,首先根據發病機理分為三大類,

1、產毒素型大腸埃希氏菌(ETEC)

2、侵襲型大腸埃希氏菌(EIEC)

3、腸道致病性大腸埃希氏菌(EPEC)

近來又提出另外兩類

4、即出血性大腸埃希氏菌(EHEC)

5、腸粘附性大腸埃希氏菌(EAEC)

但是,致病性大腸埃希氏菌的致病性是一個很複雜的問題,也並非由某一方麵的因素所決定。

致病性大腸埃希氏菌中,一般認為能產生耐熱{ST)和不耐熱(LT)腸毒素的兩種菌株均可引起人的食物中毒。引起大腸埃希氏菌幣毒的主要是一些動物性食品,如乳與乳製品、肉類、水產品等,牛和豬是傳播這種病菌、引起中毒的主要原因。

19967月在日本就發生了大腸杆菌0157型引起的食物中毒,造成9017多人中毒,10人死亡,其原因與生食蘿卜苗有關,其中92例並發出血性腸炎及出血性尿毒症。2001年,再江蘇、安徽等地爆發的腸出血性大腸杆菌0157:H7食物中毒,造成177人死亡,中毒人數超過2萬人。

如仔豬黃、白痢、豬水腫病、牛腹瀉和敗血症等均可由大腸杆菌引起。

一、生物學特性

1.形態與染色特性

菌體兩端鈍圓、中等大小,杆狀(有時呈卵圓形)1—3um X 0.6um、周生鞭毛,能運動,不產生莢膜,革蘭氏陰性,而且一般是對堿性染料著色較好,但有時兩端著色較濃,要與巴氏杆菌區分開來。

2.培養特性

1)需氧及兼性厭氧菌

2)對營養的要求不高,在普通瓊脂上就生長良好,在15C-45℃範圍內均可生長,但最適生長溫度為37℃,最適pH7.2—7.4

3)在普通瓊脂平板上培養24小時,可形成圓形、凸起、光滑、濕潤、半透明、邊緣整齊、中等大小的菌落.其菌落與沙門氏菌比較相似,但是,大腸杆菌菌落對光(45角折射)觀察可見熒光。

4)在肉湯培養基中生長1824小時變為均勻渾,而後底部出現粘性沉澱物,並伴有臭味。

5)部分菌落可出現β溶血。

6)在遠藤瓊脂上長成帶金屬光澤的紅色菌落

7)在SS瓊脂平板上多不生長,少數生長的細菌,也因發酵乳糖產酸而形成紅色菌落;

8)在伊紅美蘭瓊脂上形成具有金屬光澤的黑色菌落

9)在麥康凱瓊脂上培養24小時後孤立菌落呈紅色

3.生化特性

1)可發酵葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇產酸產氣,有些不典型的菌株不發酵或遲緩發酵乳糖;

2)不同菌株對蔗糖,衛矛醇、水楊苷發酵結果不一致。

3)本菌可使賴氨酸脫鞍、不能使苯丙氨酸脫羧。

4)不產生H2S,不液化明膠,不分解尿素,

5)、不能在氰化鉀培養基上生長,靛基質試驗陽性,V-P試驗陰性,不利用枸櫞酸鹽。後四項生化特性是典型的大腸埃希氏菌,與此不一致的即為非典型大腸埃希氏菌菌。

IMViC試驗:如IMViC試驗為++--,且乳糖發酵,表明被檢物已有糞便汙染,有發生腸道傳染病的危險,這是衛生細菌中常用的檢測指標。(I:吲哚形成試驗,M:甲基紅試驗,ViV-P試驗,C:枸櫞酸鹽利用試驗)

4.血清學特性

大腸埃希氏菌的抗原構造主要由菌體抗原(O),鞭毛抗原(H)和莢膜抗原(K)三部分組成。

1O抗原

成分為細胞壁上的糖、類脂和蛋白質複合物,也是細菌的內毒素,熱穩定性較強,高壓蒸汽處理2小時不被破壞。每一血清型隻含有一種O抗原,本菌已發現有167O抗原,分別以阿拉伯數字表示。

2H抗原

為蛋白質;一種大腸埃希氏菌隻有一種H抗原,無鞭毛則無H抗原,H抗原能在80度被破壞,也能被酒精破壞。H抗原共有64種。

3K抗原

是細胞外部的莢膜或的表麵物質,又稱包膜抗原。新分離的大腸埃希氏菌70%具有K抗原。根據K抗原耐熱的敏感性.可把K抗原分為ABL三類,共有103種,致病性大腸埃希氏菌的抗原主要為B抗原,少數為L抗原,B抗原與L抗原均可在煮沸後被破壞,A抗原耐熱性強,可耐受煮沸1小時而不被破壞。,

O抗原可將大腸埃希氏菌分成若幹血清群,再根據K抗原和H抗原進一步分為若幹個血清型或亞型,根據大腸埃希氏菌抗原的鑒定結果,寫出其抗原式如O111K58(B)H12,一般認為H抗原與致病性無關,因此,一般不需要進行H抗原的鑒定。

5.抵抗力

抵抗力中等,各菌型之間存在差異。此菌對青黴素有中等抵抗力,對一般消毒劑都比較敏感。對氯尤為敏感,水中遊離氯達到02mgL時,即可殺死此菌。此菌在土壤中、水中及糞便中可存活數月以上。

6.毒素特性

有些大腸埃希氏菌產生腸毒素,

1)不耐熱(LT)腸毒素(heat-labile enterotoxinLT):化學成分為蛋白質,分子量較大,60℃ 30分破壞,具有免疫原性,可引起腸道分泌增加,出現腹瀉。

2)、耐熱腸毒素(heat-stable enterotoxinST):分子量較小,無抗原性,100℃ 30分鍾,仍有活性,可引起腸分泌增加。

 

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