原理：細菌含有分解不同糖（醇、苷）類的酶，因而分解各種糖（醇、苷）類的能力也不一樣。有些細菌分解某些糖（醇、苷）產酸（符號：+）、產氣（符號：○），培養基由蘭變黃（指示劑溴麝香草酚蘭由蘭遇酸變黃的結果），並有氣泡；有些產酸，僅培養基變黃；有些不分解糖類（符號：－），培養基仍為蘭色。
（一）適用於需氧菌的方法
培養基 用鄧亨氏（Dunham）蛋白腖水溶液（蛋白腖1g，氯化鈉0.5g，水100ml，pH7.6按0.5～1％的比例分別加入各種糖），每100ml加入1.2ml的0.2％溴麝香草酚藍（或用1.6％溴甲酚紫酒精溶液0.1ml）作指示劑。分裝於試管（每一個試管事先都加有一枚倒立的小發酵管），10磅高壓滅菌10分鍾。
如在培養基中加入瓊脂達0.5～0.7％，則成半固體，可省去倒立的小發酵管。
0.2％溴麝香草酚藍溶液配法：
溴麝香草酚藍 0.2g
0.1N NaOH 5ml
蒸餾水 95ml
方法：從瓊脂斜麵的純培養物上，用接種環取少量被檢細菌接種於糖發酵管培養基中（如為半固體，應穿刺），在37℃培養，一般觀察2～3天，觀察時用上述符號標記之。
（二）適用於厭氧菌的方法
培養基：
蛋白腖 20g
氯化鈉 5g
瓊脂 1g
1.6％溴甲酚紫酒精溶液 1ml
糖 10g
硫乙醇酸鈉 1g
蒸餾水 1000ml
將腖、鹽、硫乙醇酸鈉、瓊脂和水放於燒瓶內，加熱使融化，再加入所需的糖，調整pH到7.0，加入指示劑，分裝試管，在10磅高壓滅菌15分鍾後，做成高層。
方法 將厭氧菌的培養物用穿刺接種法接種於上述培養基的深部，於37℃培養。結果觀察同需氧菌。
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