血液增菌肉湯、雙相血培養瓶與全自動血培養係統應用對比

1 材料和方法

　　1.1 材料

   

　　1.1.1 標本來源

　　本院2000年1月～2002年12月門診及住院患者的血液及骨髓標本    

　　1.1.2 培養基

　　法國生物梅裏埃公司的miniVITAL專用需氧血培養瓶、上海奧普生物技術公司的雙相需氧血培養瓶、浙江軍區後勤部衛生防疫檢驗所的血液增菌肉湯。   

　　1.1.3 儀器

　　法國生物梅裏埃公司的miniVITAL全自動血培養係統及VITEK32全自動微生物分析係統。   

　　1.2 方法

  　成人采血5～10ml，嬰幼兒采血1～3ml，骨髓采1～2ml，2000年1～12月標本449份注入血液增菌肉湯、2001年1～12月標本1001份注入雙相需氧血培養瓶、2002年1～12月標本1028份注入miniVITAL專用需氧血培養瓶，分別按操作規程 ［2］  、miniVITAL全自動血培養係統及VITEK32全自動微生物分析係統操作說明培養、分離、鑒定。

　　2 結果   

　　2.1 分離菌株 類

　　增菌肉湯449份標本，陽性48份，陽性率10.69%，檢出5屬7種菌;雙相瓶1001份標本，陽性245份，陽性率24.48%，檢出9屬12種菌（含苛養菌2種）;miniVITAL培養係統1028份標本，陽性228份，陽性率22.18%，檢出11屬16種菌（含苛養菌4種）。  見表1。

　　表1 增菌肉湯、雙相瓶及miniVITAL培養係統檢出菌株種類 （略）

    　　

　　2.2 陽性檢出時間及汙染率

　　增菌肉湯陽性檢出時間最快24h，最慢168h;24h檢出率2.08%（1/48），48h檢出率27.08%（13/48）;汙染率1.11%（5/449）。雙相瓶陽性檢出時間最快16h，最慢168h;24h檢出率9.39%（23/245），48h檢出率58.78%（144/245）;汙染率0.60%（6/1001）。miniVIˉTAL培養係統檢出時間最快2.5h，最慢168h;24h檢出率60.53%（138/228），48h檢出率89.04%（203/228）;汙染率0.39%（4/1028）。

　　3 討論

　　3.1 增菌肉湯、雙相瓶、miniVITAL 培養係統的血培養陽性率分別 10.69%、24.48%、22.18%，分別檢出5屬7種菌、9屬12種菌（含苛養菌2種）、11屬16種菌（含苛養菌4種），說明雙相瓶、miniVITAL培養係統比增菌肉湯 適於細    菌，特別是苛養菌生長。

3.2 由於雙相瓶加入瓊脂斜麵，減少了轉種環節，有利於細菌特別是苛養菌生長，因此血培養陽性檢出時間較增菌肉湯有所加快，而miniVITAL培養係統采用同源熒光技術，以CO 2 生成、pH值改變、氧化還原電位變化所致熒光下降的程度反映微生物的生長，它可以15min判讀1次，因而使血培養陽性檢出時間 大提高，實驗表明miniVITAL培養係統的24h、48h陽性檢出率均遠高於雙相瓶及增菌肉湯。3.3 實驗顯示，由於采用了塑蓋和膠塞結合的瓶蓋工藝，使雙相瓶、miniVITAL培養係統血培養汙染率僅分別為0.60%、0.39%，而無此工藝的增菌肉湯血培養汙染率則高達1.11%。總之，由於富含細菌，尤其是苛養菌生長所需的氨基酸、維生素及生長因子等營養素，含有可抗凝、抗補體、抗吞噬、拮抗某些抗菌藥物的聚茴香腦磺酸鈉，使雙相瓶、miniVITAL培養係統比增菌肉湯更有利於各類病原菌快速生長;而采用塑、膠結合瓶蓋可減少雙相瓶、miniVITAL培養係統汙染可能性;由於使用了同源熒光技術，自動偵測技術，miniVITAL培養係統陽性檢出時間大大快於雙相瓶及增菌肉湯。本次實驗表明miniVITAL培養係統能高速、準確地檢出包括苛養菌在內的 種病原菌，但成本較高，適於在省、市級的大、中型醫院及條件較好的縣級醫院使用，雙相瓶能較快、較準地檢出病原菌，適於在 般縣級醫院使用，而傳統增菌肉湯因其檢出率低，檢出速度慢而應逐步淘汰。

 

作者：郭 民 孟 偉

　　參考文獻    

　　1 周貴民.努力提高血液細菌培養陽性率.中華醫學檢驗雜誌，1999，22:69-70.

　　2 葉應嫵，王毓三.全國臨床檢驗操作規程，第2版.南京:東南大學出版社，1997:475-548.