摘要 目的 控製醫院金黃色葡萄球菌感染，揭示其病原體特性及流行病學規律 方法 對28例金黃色葡萄球菌感染患者的臨床資料和病原菌的藥敏試驗和PRAD基因聚類進行分析。結果 醫院感染患者MRAS占60.71%，MSSA39.28%，病原體對青黴素耐藥率達86.1%，對常用 二代頭孢菌素和喹諾酮藥物的敏感率低於40%。噬菌體Ⅲ型構成比占60.7%，PRAD聚類分型產生3 聚類群。結論 對感染患者進行臨床和細菌病原學特征分析，可提供病原菌傳播與生存的本質資料。
Clinical and genetic cluster analysis of
nosocomial infect ion of Staphylococcus aureus
Jin Guiming Zhang Xiaozhen Wang Yingqun Ding Jinbing
Wuhan General Hospital of Guangzhou Region PLA, Wuhan 430070
Abstract OBJECTIVE To control nosocomial infection of Staphylococcus aureus and to reveal the epidemiology of infectio n. METHODS The clinical data, drug sensiti vity test and RAPD assay of Staphylococcus aureus from 28 patients were isolated and analized. RESULTS Hospital-acquisiti on of MRSA occurred in 60.71%, whereas MSSA occurred in 39.28% of patients. The r esistant rate of pathogens to penicillin was 86.1% and the sensitivity rates to 1st and 2nd generation of cephalosporins and quinolones were less th an 40%. The 28 strains could be classified into 3 clusters by RAPD assay and 60. 7% of them belonged to group Ⅲ by phage typing. CONCLUSION By investigation of clinical background and identifica tion of the characteristics of the pathogens, the epidemiology of nosocomial inf ection may be revealed.
Key words Staphylococcus aureus Nosocomia l infection Genetic cluster anlysis
金黃色葡萄球菌(金葡菌)是引起醫院感染常見的病原菌之一，近年來文獻報道金葡菌對甲氧西林的耐藥率不斷升高［1、2］，給臨床治療帶來困難。為控製金葡菌醫院感染，我們調查分析了金葡菌感染患者的臨床和病原體特征，以揭示流行病學的規律。
1 材料與方法
1.1 調查對象 1997年1～12月對我院呼吸內科和神經內科住院患者，有感染體征並在送檢標本中分離到金葡菌者，列為調查對象。
1.2 調查方法 對患者的感染部位、住院時間、治療經過以及細菌學檢查進行臨床調查。
1.3 病原體特性鑒定
1.3.1 常規鑒定方法 來自患者痰、尿、血培養物，分離病原株革蘭氏染色陽性的葡萄球菌，試管凝固酶陽性鑒定為金葡菌。對照標準菌株(金葡菌AB91053、94005)由中國武漢典型培養物保藏中心提供。
1.3.2 噬菌體分型 采用成都衛生部生物製品研究所提供的分型噬菌體，以常規稀釋度RTD和100KTD滴定後，觀察其結果［3］。
1.3.3 遺傳聚類圖繪製 首先進行隨機 態性(RAPD)分析［4］。將圖譜通過凝膠成像係統(Stratagene公司生產)掃描成像，采用PHYLIP3.5CRAPD分析軟件分析得到指紋圖譜，據此繪製菌株之間的遺傳聚類圖［5］。
1.4 醫院感染診斷 依據《醫院感染學》中的診斷標準［6］。
2 結 果
2.1 臨床分類 金葡菌感染病例28人，其中院內感染21例(75%)，院外感染7例(25%)。感染部位以肺部感染為主23例(82.14%)，全身感染3例(10.71%)，尿路感染1例，口腔感染1例(3.57%)。院內感染發生的時間，除1例為第124天外，其餘14～65天，平均為32.3天。基礎疾病肺心病6例、肺癌術後8例、支氣管擴張1例、腦溢血6例、腦梗塞5例、紅斑狼瘡1例、敗血症1例。
2.2 細菌分類及藥敏 院內感染21株金葡菌，耐甲氧西林(MRSA)14株(66.67%)，甲氧西林敏感菌(MSSA)7株(33.33%)。7例院外感染金葡菌MRSA1株(14.28%)，MSSA6株(85.71%)。28株金葡萄對萬古黴素敏感率達100%，舒普深、氧氟沙星、丁胺卡那的敏感率達90%以上，對頭孢拉啶、先鋒Ⅴ號、頭孢呋肟及環丙沙星、諾氟沙星的敏感率低於40%以下，對青黴素的耐藥率達86.1%。
2.3 噬菌體分型 28株金葡菌作噬菌體可分型25株，分型率為89.29%構型，以Ⅲ群為主，其構成比為60.7%，其次是混合群14.2%，Ⅰ群7.1%，Ⅴ群和其它類型各1株(3.5%)，Ⅱ群為零。
2.4 RAPD聚類分型 15株病原菌的14株及2株標準株產生特異性譜型，遺傳聚類分型可將8株臨床株和1株不相關株分為3個類群。
2.5 抗生素使用 全部患者預防或治療使用了抗生素，其中頭孢類占67.85%，喹諾酮類占42.85%，氧呱嗪青黴素14.29%，林可黴素35.71%。抗生素持續使用時間9～22天，平均14.2天。
3 討 論
3.1 金葡菌在醫院感染病原菌中占有重要的位置，尤其是MRSA因其多重耐藥，治療效果差而倍受醫院感染控製人員的關注。據日本1990年43所國立 學調查［7］，MRSA分離頻 平均為52.52%，最低27.2%，其中住院患者占65%，門診占23%。我院金葡菌感染的MRSA分離數僅為53.57%，低於1990年武漢協和醫院76.6%和1995年上海華山醫院80.8%的分離數［8、9］，分析其原因我院是一所部隊醫院，在收治患者的危重程度和抗生素使用上，與地方教學醫院尚存在差異。
3.2 本組資料表明，醫院感染患者中MRSA的檢出率明顯高於院外感染患者，兩者相比差異非常顯著(P＜0.05)。據文獻報道［7］，住院1周內MSSA和MRSA檢出率分別為17.0%和36.2%，而住院1個月及1個月以上者檢出率分別為31.2%和62.5%，後者極明顯高於 者。尤其是使用抗生素兩周以上者可成為MRSA產生的易感染因素。
3.3 金葡菌的噬菌體分型可進一步識別細菌的特性，本組金葡菌構型主要是Ⅲ型，其次是混合型，符合文獻報道的MRSA的噬菌體分型多為Ⅲ型和混合型，MSSA的Ⅱ型高於MRSA組［7］。
3.4 作者曾將本組資料中14株病原株的RAPD譜型作過比較［4］，其譜型均不同。6、7號來自於同一患者相同部位、不同時間的分離株，在RAPD譜型上存在細微差異，但反映到聚類分型結果上兩者遺傳關係最近， 表明RAPD技術能夠較好地反映分離株之間的克隆關係。
綜上所述，通過對金葡菌感染的患者進行臨床、病原菌的藥敏試驗和RAPD基因聚類係統地分析，了解其臨床資料和病原菌特性的相關特性，可為醫院感染及微生物流行病研究，提供了細菌傳播與生存的本質資料。
作者：靳桂明 張曉珍 王穎群 丁進兵《中華醫院感染學雜誌》
參考文獻
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