中文版  |   English  |   加入收藏  |   客服熱線:400-0532-596
微生物技術資料
文章檢索
  首頁 > 微生物知識->細菌基本知識和檢測方法->實驗——酸乳中乳酸菌的測定

實驗——酸乳中乳酸菌的測定



錄入時間:2011-4-12 13:08:35 來源:天津農學院精品課程

1 目的
1.1 了解酸乳中乳酸菌分離原理
1.2 學習並掌握酸乳中乳酸菌菌數的檢測方法。
2 原理
    活性酸奶需要控製各種乳酸菌的比例,有些國家將乳酸菌的活菌數含量作為區分產品品種和質量的依據。
    由於乳酸菌對營養有複雜的要求,生長需要碳水化合物、氨基酸、肽類、脂肪酸、酯類、核酸衍生物、維生素和礦物質等,一般的肉湯培養基難以滿足其要求。測定乳酸菌時必須盡量將試樣中所有活的乳酸菌檢測出來。要提高檢出率,關鍵是選用特定良好的培養基。采用稀釋平板菌落計數法,檢測酸奶中的各種乳酸菌可獲得滿意的結果。
3 材料
3.1培養基
    MRS培養基,改良CHALMERS培養基,M17培養基。
3.2 儀器和器具
    無菌移液管(25ml,1ml),無菌水(225ml帶玻璃珠三角瓶,9ml試管),無菌培養皿,旋渦均勻器。
    恒溫培養箱。
4 流程
酸奶→稀釋→製平板→培養→檢查計數
5 方法
5.1 樣品稀釋
    先將酸奶樣品攪拌均勻,用無菌移液管吸取樣品25ml加入盛有225ml無菌水的三角瓶中,在旋渦均勻器上充分振搖,務必使樣品均勻分散,即為10-1的樣品稀釋液,然後根據對樣品含菌量的估計,將樣品稀釋至適當的稀釋度。
5.2 製平板
    選用2~3個適合的稀釋度,培養皿貼上相應的標簽,分別吸取不同稀釋度的稀釋液1ml置於平皿內,每個稀釋度作2個重複。然後用溶化冷卻至46℃左右的MRS或改良CHALMERS培養基倒平皿,迅速轉動平皿使之混合均勻,冷卻成平板。
5.3 培養和計數
    將平皿倒置於40℃恒溫箱內培養24~48h,觀察長出的細小菌落,計菌落數目,按常規方法選擇30~300個菌落平皿進行計算。
6 結果
6.1 指示劑顯色反應
    乳酸菌的菌落很小,1~3mm,園形隆起,表麵光滑或稍粗糙,呈乳白色、灰白色或暗黃色。由於產酸菌落周圍能使CaCO3產生溶解圈,酸堿指示劑呈酸性顯色反應。
6.2 鏡檢形態
    必要時,可挑取不同形態菌落製片鏡檢確定是乳杆菌或乳鏈球菌。保加利亞乳杆菌呈杆狀,成單杆、或雙杆菌或長絲狀。嗜熱鏈球菌,呈球狀,成對、或短鏈、或長鏈狀。
6.3 參照比較
    據介紹,改良CHALMERS培養基的檢出率較MRS培養基高,M17培養基較適合於乳球菌的培養,在檢測時可同時使用多個培養基作比較。
7 思考
1 為什麽乳酸菌的檢測關鍵是選用特定良好的培養基?
2 培養基中為什麽要加CaCO3

 

上一篇:實驗——噬菌體的檢查及效價測定

下一篇:實驗——生牛乳自然發酵過程微生物菌相的變化

首頁 | 關於我們 | 網上商城 | 在線客服 | 聯係我們
業務聯係電話
   400-0532-596 0532-66087773
   0532-66087762 0532-81935169
郵箱:qdhbywg@vip.126.com
地址:青島市城陽區錦匯路1號A2棟
產品技術谘詢
  工作日(周一至周六8:00-18:00):
  18562658263 13176865511
  其它時段:13105190021
投訴與建議:13105190021 13006536294