1目的
1.1 觀察黴菌的菌絲以及菌絲體。
1.2 觀察黴菌營養和氣生菌絲體的特化形態
1.3 學會用水浸法觀察黴菌的技術。
2 原理
黴菌形態比細菌、酵母菌複雜,個體比較大,具有分枝的菌絲體和分化的繁殖器官。黴菌營養體的基本形態單位是菌絲,包括有隔菌絲和無隔菌絲。營養菌絲分布在營養基質的內部,氣生菌絲伸展到空氣中。營養菌絲體除基本結構以外,有的黴菌還有一些特化形態,例如假根、匍匐菌絲、吸器等。黴菌的繁殖體不僅包括無性繁殖體,例如分生孢子,孢子囊等,包裹其內或附著其上的有各類無性孢子;還包括有性繁殖結構,例如子囊果,其內形成有性孢子。在觀察時要注意細胞的大小,菌絲構造和繁殖方式。
3 材料
3.1器械
接種針、接種環、酒精燈、載玻片、蓋玻片、吸管
3.2藥品
乳酸一石炭酸液、PDA培養基(配方見附錄)
3.3菌種
黑根黴(Rhizopus nigricans)、總狀毛黴(Mucor racemosus)、產黃青黴(Penicillum chrysogenum)、木黴(Trichoderma spp.)、黑曲黴(Aspergillus nigricans)、犁頭黴(Absidia spp.)等斜麵菌種。
4 流程
倒平板→接種→製片→鏡檢→描述繪圖
5 步驟
5.1倒平板
將PDA培養基熔化後,倒10~12毫升左右於滅菌培養皿內,凝固後使用。
5.2接種與培養
將青黴、木黴、毛黴、曲黴、根黴等接種在不同的平皿中。置於28—30℃的恒溫箱中培養3-7天。
5.3製水浸片
取潔淨的載玻片,滴加一滴乳酸一石炭酸液,挑取不同菌株的一團菌絲,分別置於不同的載玻片上(用記號筆標記菌株名稱),加蓋玻片。
5.4觀察
5.4.1觀察青黴、木黴、毛黴、曲黴形態
選取標記青黴、木黴、毛黴、曲黴的載玻片,觀察黴菌的菌絲及其分隔情況。觀察菌絲體。觀察分生孢子著生情況(要求辨認分生孢子梗、頂囊、小梗及分生孢子)。
5.4.2 觀察根黴形態
選取標記根黴的載玻片,觀察假根、匍匐枝、孢子囊柄、孢子囊以及孢囊孢子。
5.4.3 觀察犁頭黴形態
選取標記犁頭黴的載玻片,觀察梨頭黴的接合孢子。
6 結果
7.1把觀察到的各種黴菌繪圖,並注明各部分名稱。
7.2列表比較根黴與毛黴;青黴與曲黴在形態結構上的異同。
7 思考
7.1為何要用乳酸一石炭酸溶液作黴菌水浸片?
7.2比較黴菌菌絲與假絲酵母菌絲的區別。
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