愛好者在家庭環境下進行組織培養的探討與建議植物組織培養技術,尤其是快速繁殖,並非隻有專業人員和專業實驗室才能夠完成的。作為對多肉植物和組織培養有著濃厚興趣的愛好者,在充分利用家庭條件的基礎上,同樣可以製備出自己的試管苗來的。在我們進行多肉植物的栽培中認識到,一些比較名貴的園藝品種,比如:萬象、玉扇、壽、高紋鷹爪等十二卷屬品種,還是繽紛橄欖、何魯牽牛等塊莖類植物,甚至於星球屬、岩牡丹屬等等,這些植物的常規繁殖係數很低,他們都可以采用組織培養來解決其繁殖問題,並且可以得到相當數量的幼苗。對於奇想天外等種子萌發困難的植物,同樣可以借助組織培養來進行無菌播種。在進行組織培養過程中,不但可以對培養的植物有更深一層的認識,對常規的栽培有著相當大的意義。許多搞組織培養的專家,最初都不是專業學組培的,就是憑著興趣和探索精神取得輝煌成績的。關鍵是,愛好者有著濃厚的興趣,非凡的觀察力和細致入微的操作,這些都可以彌補非專業的缺陷,並且可以充分利用日常生活中的各種可利用資源,這些就足以讓愛好者在家庭環境下完成組織培養了。同時這也不僅僅滿足了自己的興趣,還可以有一定的經濟收益,甚至可以有所創新和發明。
一、如何解決場地和基本設備:
進行組織培養,沒有一定的設備是無法開展的。正規實驗室的組織培養設備是昂貴的,不適合家庭消費,但如果能有途徑買到廉價的實驗室設備,那就在好不過了。如果沒有辦法搞到實驗室設備,就不妨動手自己製作一些簡單的設備。
1.無菌操作的主要設備——接種箱和壓力鍋:
接種箱:植物組織培養的主題操作需要在一個相對密閉的無菌環境中進行。那麽說我們首先要創造一個密閉的環境,可以利用一些木料、塑料板、有機玻璃、鋁合金骨架等等廉價的材料,動手粘合一個小巧的接種箱。具體的參數可以找一本“食用菌栽培”的書籍,模仿種蘑菇的接種箱做一個即可。需要注意的是,組織培養的接種箱的密閉性要求比較高,盡量避免腐朽的木材和易生鏽的材料,箱子的頂端按放兩盞燈:20w的紫外線燈和20w的日光燈。箱體的周邊盡量采用玻璃材料,因為這樣便於觀察,有時候接種箱還可以借用為培養箱,周邊采用玻璃材料更方便於觀察和培養。
高壓鍋:主要用來對培養基和其他材料的滅菌。在實驗室通常使用醫用高壓滅菌器,然而在家庭要充分利用廚房使用的高壓鍋,高壓鍋的壓力要低於滅菌器,但是適當延長滅菌時間,還是可以取得較好的效果的。比如:對培養基滅菌40分鍾就基本上可以達到滅菌效果(滅菌器是20分鍾);無菌水采用間歇滅菌法,先用高壓鍋壓40分鍾,放置24小時,再壓20分鍾即可達到效果。
2.場地:
這個就因人而易了,總體的要求就是進行組織培養操作的地方要盡量無塵,減少空氣流動,最好有一定的陽光。比如書房、寫字間都可以用來進行無菌操作。
進行培養基的配製可以借用一下廚房,但所使用的器具必須和廚具分開。一般說,組織培養中的幾乎全部化學物質對人體是無害的,除了少數激素類物質和滅菌劑。對於有毒害的物質,需要認真保管,以免發生危險。
3.輔助設備:
主要指冰箱,它是用來儲存化學物質和培養基的。天平,可以采用感量在100克的托盤天平,甚至用中藥的藥衡都可以代替。培養架,這個就更簡單了,采用鋁合金-玻璃的培養箱既可以滿足要求,如果日光不足,可配合日光燈補光等。
4.化學試劑:
化學試劑是不可缺少的,因為組織培養的核心就是培養基的成分,而並不是簡單的無菌操作。一些用量較大的化學物質是有必要買的,比如大量元素(硝酸銨、硝酸鉀、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、氯化鈣等)、高錳酸鉀、甲醛、酒精、白砂糖、瓊脂等等。微量元素和有機複合物不需要購買,因為它們的用量很小,我們可以用蔬菜浸汁或者馬鈴薯浸汁來代替。激素是必不可少的,他們的稱量需要借助分析天平,但這是家庭條件所不允許的,如果有條件可以借助關係單位代替配成母液,每次取一些使用即可。最好的辦法是到農資商店(賣農藥化肥的地方),它們一般出售農業用的激素,有的是用安瓿裝的,按照一定的比例加入到培養基當中即可。近幾年來,有些化學品公司開始生產植物組織培養基原粉,隻需要稱取一定量加水即可,很方便。比如泛生化學品公司生產的ms原粉,隻需要稱量40克,加1升水,用微波爐加熱5分鍾即可分裝,相當簡便。
消毒劑通常采用氯化汞(劇毒),如果不容易搞到,可以用漂白粉代替。
調節酸堿度時,可以采用家庭常用的純堿和白醋。
5.培養容器和玻璃儀器:
組織培養的容器要求並不高,隻要玻璃顏色為透明色即可(鈉玻璃不可以)。
我們可以到垃圾站去看看,撿回一些廢舊的果醬瓶就可以了。比較好用的是阿香婆辣醬瓶,我們實驗室也是采用的這種瓶子。瓶子的封口膜采用聚丙烯塑料即可,如果不好找到,可以采用微波爐專用的錫箔紙甚至方便麵的袋子,折疊成雙層,用橡皮圈固定即可。
其它玻璃儀器,比如燒杯、玻璃棒都可以用家庭的杯子和筷子代替;一些度量儀器,如量筒和移液管最好到玻璃儀器商店購買,恐怕花不了20元錢就可以配置一套相當棒的組培玻璃儀器。
6.其它:
還有一些用品是必需的。比如精密ph試紙(5.4~7.0),需要買一本,大約花1.5元即可搞定;酒精燈也不需要買,用墨水瓶配上一個玻璃環,再加上一個棉花芯,最後用農夫山泉礦泉水的瓶蓋做燈冒,這樣的酒精燈很小巧,適合接種箱使用。刀子剪子鑷子是必需的,到花市的工具攤位上,花10元錢全部搞定,注意選比較小巧的工具。
關於用水,按理說應該使用蒸餾水,但是我們家庭飲用的純淨水比蒸餾水還要純,那麽說借用一些飲用水就可以了。我們曾經采用康師傅純淨水進行動物細胞的培養,效果都是很不錯的,更何況於植物細胞培養了。
以上是組織培養的基本設備和試劑,主要突出了他們相關的替代品,因為作為組織培養中的快速繁殖,它的要求是相當低的。我們的家庭培養和工廠化是不同的,工廠化生產組培苗要追求高增殖率,所以它的要求就比較精細和標準。我們的家庭培養則不需要那麽準確,隻要達到培養成功的目的即可。當然,如果想提高增殖倍率和試管苗的品質,必須盡量貼近實驗室的用具和器材,代用品總是有一定的缺陷的。
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