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誌賀氏菌及其檢驗(下)



錄入時間:2011-4-29 9:15:25 來源:食品夥伴網

二、中毒機製與中毒症狀
1.致病性
誌賀氏菌既可產生內毒素和外毒素。誌賀氏杆菌是侵入性細菌,隻需千個、百個、甚至幾個就可能引起疾病發生,與大腸埃希氏菌不同。後者需要食入大量細菌才會引起中毒。菌體進入體內後侵入空腸粘膜上皮細胞繁殖,產生外毒素,菌體破壞後產生內毒素作用於腸壁、腸壁粘膜和腸壁植物性神經。
2.主要症狀
潛伏期一般為10h~20h,短者6h,病人會出現劇烈的腹痛、嘔吐及頻繁的腹瀉,並伴有水樣便,便中混有血液,發熱,體溫高者可達40℃以上,有的病人出現痙攣。
3.中毒特點:
季節:多發生於7-10月。食品種類:主要是涼拌菜。中毒發生的原因:本菌攜帶者或食品加工、集體食堂、飲食行業的從業人員患有痢疾時,手時汙染食品的主要因素。
三、檢驗     誌賀氏菌檢驗程序
主要步驟:增菌    分離和初步的生化試驗     血清學分型和進一步的生化試驗
1 增菌:目前檢驗誌賀氏菌還沒有理想的增菌和分離培養基,一般采用直接分離的方法。但當樣品中含有雜菌、數量較少時,應進行增菌。增菌常用GN肉湯或MM肉湯。以25g(mL)檢樣在225mL肉湯中於35~37℃孵育6h~8h,或30℃ 16~20h。 增菌培養時間可以視具體情況而定,當培養也出現輕微混濁時即應中止培養。
2 分離和初步的生化試驗
分離:培養基有SS瓊脂、 HE瓊脂、麥康凱瓊脂、EMB瓊脂、DC瓊脂、木糖賴氨酸去氧膽酸鹽瓊脂等。用於分離的鑒別培養基,一般不少於2個。將增菌培養物劃線接種於上述平板上,經37℃16~20h,挑出典型菌落,進行純培養及生化試驗等。
誌賀氏菌的菌落特征  SS瓊脂、麥康凱瓊脂、DC瓊脂:不透明或透明的無色菌落。HE瓊脂:形成藍色菌落,中心不發黑。
挑選可疑菌落,接種三糖鐵(TSI)瓊脂和葡萄糖半固體各一管, 37℃18~24h,分別觀察結果。若培養後TSI上層不產酸、下層產酸不產氣、不產生硫化氫,發酵葡萄糖產酸不產氣,無動力,可疑似誌賀氏菌,應進一步做生化鑒定和血清學鑒定。
3 血清學分型和進一步的生化試驗:
血清學分型:玻片凝集試驗。先用四種多價血清(A群1型、A群2型、B群和D群)。根據群因子血清凝集結果,依次選用型因子血清檢查。
進一步的生化試驗:賴氨酸和鳥氨酸脫梭酶、西蒙氏枸櫞酸鹽、葡萄糖銨鹽、pH7.2尿素、KCN、水楊苷和七葉苷水解。除宋內氏和鮑氏13型鳥氨酸酶陽性外,其餘均為陰性。
Several media have been designed to selectively grow enteric bacteria and allow differentiation of Salmonella and Shigella from E. coli. The primary plating media shown here are eosin methylene blue (EMB) agar, MacConkey agar, ENDO agar, Hektoen enteric (HE) agar and Salmonella-Shigella (SS) agar.

 

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