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誌賀氏菌屬檢驗的標準操作程序



錄入時間:2011-5-11 10:17:18 來源:互聯網

目的
    指導檢驗傷寒、副傷寒沙門氏菌。
該SOP變動程序
    本標準操作程序的改動,可由任一使用本SOP的工作人員提出,並報經下述人員批準簽字:專業主管、科主任。
【標本的采集】
    由受檢者將采便用已蘸有甘油鹽水的棉棒自行插入肛門內,輕輕轉動,然後取出,插入帶有編號的塑料試管中,交給檢驗科人員。
【檢驗程序】
    采便→立即劃線接種SS平板→培養後挑取可疑菌落接種三糖鐵斜麵及半固體培養基→生化學試驗→血清學試驗→報告檢驗結果。
【操作步驟】
    1.      分離培養
采便後立即用采便棒劃線接種SS瓊脂平板。36±1℃培養18-24小時,挑取無色半透明的光滑菌落分解乳糖或遲緩分解乳糖的光滑菌落,接種三糖鐵斜麵及半固體,36±1℃培養18-24小時。
     2.      生化學試驗
凡是三糖鐵反應符合誌賀氏菌屬特征者(斜麵產堿或不變色,底層產酸,H2S(—),產氣(—),但福氏6型產生少量氣體)、無動力、革蘭氏陰性杆菌、作V-P試驗,苯丙氨酸,賴氨酸,檸檬酸鹽,葡萄糖銨試驗。其結果全部陰性者,作血清學試驗。
    3.      血清學試驗
挑取三糖鐵斜麵上的培養物
    福氏菌的鑒定:凡是與福氏多價血清凝集的菌株,可先用3、4,群6,群7,三種因子血清檢查,根據群因子血清反應結果,再用型因子血清檢查。福氏菌抗原成分如下
 
    福氏誌賀氏各菌型與五型抗原成份
型抗原
群抗原
在群因子血清中的凝集反應
3、4
6
7、8
a
I
1,2,4,5,9………
+
-
-
b
I
1,2,4,5,6,9……
+
+
-
2a
1,3,4………
+
-
-
2b
1,7,8,9……
-
-
+
3a
1(3,4),6,7,8,9…
(+)
+
+
3b
1,(3,4),6……
(+)
+
-
4a
1,3,4………
+
-
-
4b
1,3,4,6………
+
+
-
5a
1,3,4………
+
-
-
5b
1,5,7,9………
-
-
+
6
1,2,(4)………
(+)
-
-
變種
1,7,8,9………
-
-
+
變種
1,3,4………
+
-
-
( )內的抗原可能不存在。
    4.      菌型的判定和結果的報告 
    根據生化學試驗和血清學分型試驗結果,判定菌型,報告結果。
【質量控製要求】
   1.      增菌及分離必須保證一個一支增菌管,一塊平板,禁止多人一管,多人一塊平板。
   2.      分離平板時平板一半以上應有孤立菌落,以供挑選。

 

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