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臨床微生物檢驗質量控製要求(3)



錄入時間:2011-5-25 10:06:43 來源:檢驗地帶網

 四、培養基的質量控製
  用於各種臨床標本中微生物分離、鑒定的培養基種類很多。以前,都由實驗室自配,現在已有成品供應。無論成品培養基還是自製培養基,其質量好壞直接影響微生物檢驗結果的準確性,因此必須對培養基作以下三方麵質控。
 
 
1 .一般性狀
  培養基的一般性狀包括外觀、厚度、 pH 值等。剛配製的液體培養基,其外觀應透明、清亮、無混濁、無沉澱,顏色符合要求。新鮮的固體培養基應具有特定的顏色,表麵濕潤但無水汽、平整、光潔無凹坑和氣泡。整塊平板厚薄均勻,一般厚度在 3mm ,但 MH 平板的厚度不得小於 4mm 。斜麵的長度不得超過試管長度的 2 / 3 。應經常觀察貯存培養基的質量是否合格。若試管內液體培養基液麵降低,表明水分蒸發,培養基濃縮。當固體培養基發生顏色改變,表麵幹燥,出現裂紋或邊緣的瓊脂與平板或試管分離時,應不再使用。培養基的 pH 是細菌生長的重要條件之一,一般而言合格培養基的 pH 應在規定值上下 0.2 的範圍內。
2 .無菌試驗
 
 
  新製備的培養基要按批號隨機抽取一定數量的樣品作無菌試驗。對於壓力蒸氣滅菌後傾注的固體培養基,抽樣後放 35 ℃ ± 1 ℃ 溫箱培養 24-48h ;滅菌後經無菌操作分裝的液體培養基要全部放入 35 ℃ ± 1 ℃ 溫箱內培養 24h ;對有些無需高壓滅菌隻需煮沸消毒的選擇性培養基要取部分瓊脂,放入無菌肉湯管培養 24h :上述試驗證實無細菌生長時才算合格。若有細菌生長,說明培養基製備過程中已受雜菌汙染,除了尋找原因外,應不再使用。
 
3 .細菌生長試驗
 
  所有的培養基在使用前除了做無菌試驗外還必須做細菌生長試驗以測定培養基性能是否符合要求。要用已知的標準菌株按照 NCCLS 推薦的方法作質控。質控所需的標準菌株分 2 種:一種是已知的可在某種培養基上生長並產生典型生物學性狀的,對培養基中的某種物質產生陽性反應的菌株;另一種是用已知的不能在某種培養基上生長或對培養基中的某種物質產生陰性生化反應的菌株。表 2 列出 10 種常用固體培養基的質量鑒定標準及所需標準菌株。
 
 
 
  無論是廠家的成品培養基還是實驗室自製的培養基,都應經過上述三方麵的檢驗才能證實其質量是否合格。廠家應將所做的試驗內容形成書麵的質量鑒定送交客戶保存。實驗室自行配製過程中應對上述鑒定內容有明確記載。此外還應對培養基配製原料的性狀、批號、失效期以及配製過程各個環節的操作形成記錄。
表 2 12 種常用培養基的質量鑒定
培養基名稱
質控菌株
ATCC
鑒定標準
血平板
金黃色葡萄球菌
25923
中度到大量生長
化膿性鏈球菌
19615
生長,β-溶血
肺炎鏈球菌
6305
生長,α-溶血
大腸埃希菌
25922
生長
巧克力平板
流感嗜血杆菌
10211
生長
腦膜炎奈瑟菌
13090
生長
淋病奈瑟菌
43096
生長
伊紅美藍平板
鼠傷寒沙門菌
14028
生長,無色到琥珀色菌落
大腸埃希菌
25922
生長,藍黑菌落,金屬光澤
糞腸球菌
29212
部分抑製
麥康凱平板
大腸埃希菌
25922
生長,紅色菌落
奇異變形杆菌
12453
生長,無色菌落,遷徙現象部分抑製
鼠傷寒沙門菌
14028
生長,無色菌落
糞腸球菌
29212
部分抑製
SS平板
鼠傷寒沙門菌
14028
生長,無色菌落,有或無黑心
福氏誌賀菌
12022
生長,黑色菌落
糞腸球菌
29212
全部抑製
大腸埃希菌
25922
部分或全部抑製
TCBS平板
霍亂弧菌
9459
生長,黃色菌落
副溶血弧菌
17802
生長,藍色菌落
大腸埃希菌
25922
部分或全部抑製
營養瓊脂平板
沙保弱平板
福氏誌賀菌
12022
中度到大量生長
白色念珠菌
10231
生長
大腸埃希菌
25922
部分或全部抑製
羅氏培養基
結核分枝杆菌H37Ra
25177
生長
大腸埃希菌
25922
部分或全部抑製
淋病選擇性培養基
淋病奈瑟菌
43096
生長
奇異變形杆菌
43071
部分抑製
表皮葡萄球菌
12228
部分抑製
 

 

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