36、厭氧培養基(GAM肉湯)
成份: 大豆腖 3克 口腖 10克 消化血清粉 13.5克 酵母浸膏 5克 牛肉膏 2.2克 牛肝膏(粉) 1.2克 葡萄糖 3克 KH2PO4 2.5克 可溶性澱粉 5克 L-半胱氨酸鹽 0.3克 硫乙醇酸鈉 0.3克 肉湯(牛心湯) 1000毫升調PH7.2--7.4,10磅高壓滅菌15分.
用途:用於厭氧菌培養,是一般培養基的基礎,此培養基營養最豐富,用時無需加血,可用於各類厭氧菌增菌用.
37、GMA瓊脂
成份: 蛋白腖 10克 大豆腖 3克腖 10克 消化血清粉 13.5克 酵母浸液 5克 牛肉膏 2.2克 牛肝膏 1.2克 葡萄糖 3克 KH2PO4 2.5克 氯化鈉 3克 可溶性澱粉 5克 L-半胱胺酸鹽酸鹽 0.3克 硫乙醇酸鈉 0.3克 瓊脂 1.5克 DW 1000毫升 調PH7.2--7.4,10分鍾高壓滅菌.
注意:1可溶性澱粉加熱易成糊狀凝塊,最好先用水少許將澱粉混勻,再加沸水使成糊狀,備用. 2此培養基營養豐富,無需加促進物質.
用途:用於分離培養厭氧菌.
38、硫乙醇酸鹽半固體瓊脂
成份: L-半胱氨酸 0.25克 葡萄糖 6克 胰蛋白腖 17克 大豆腖 3克 硫乙醇酸鈉 0.1克 氯化鈉 2.5克 亞硫酸鈉 0.1克 瓊脂 0.7克 DW 1000毫升 調PH7.6,11磅高壓15分鍾.
附:添加劑: 液體培養基0.1ug/毫升或0.1單位/毫升.固體培養基最終濃度10ug/毫升,冷卻後再加VitKL.
39、淋球菌培養基: 基礎瓊脂 3.4克 無菌抗凝羊血 10毫升 20%葡萄糖溶液 1毫升萬古黴素 0.2毫升 多粘菌素B 0.0375毫升 水 90毫升
用法: 1取基礎瓊脂浸泡於水中,加熱煮沸溶解,121℃高壓滅菌20分鍾. 2加入羊血和葡萄糖,於90℃水浴中加熱,不時搖動使成咖啡色. 3冷卻至60℃,加入萬古黴素和多粘菌素B溶液,搖勻倒入平板,凝固備用.
40、醋酸鉛試紙培養基(測H2S)
成份: 蛋白腖 10克 胱氨酸 0.1克 硫酸鈉 0.1克 水 1000毫升 PH7.0-7.4 ,115℃高壓滅菌20分鍾. 濾紙剪成0.5-1CM寬,用5%-10%的醋酸鉛浸透,烘幹,置平皿備用.
臨床微生物培養基種類、製備及用途(9)
41、厭氧培養基
1 液體培養基 多價蛋白腖 20% 胰蛋白腖 1% 酵母浸出汁 0.5% 氯化鈉 0.5% 牛肉膏 5% 半胱胺酸 0.04% 氯化血紅素 0.5% 溶劑(牛肉浸出液)溶解調PH7.4
2固體培養基: 加瓊脂粉2.25%作血平板. LISTER(100毫升)液體用:蛋白腖 2% 牛肉膏 5% 氯化鈉 5% 酵母浸 0.5% 牛心浸液作溶劑瓊脂粉 0.8% 調PH7.4,每瓶25-30毫升分裝.固體用:同上,加溫後加右旋糖苷20毫升或60℃左右加入明膠15%.
42、指示劑
1 NaOH 溶液: 0.1N NaOH 6毫升 DW 1000毫升
2 0.015%美蘭溶液:0.5%美蘭 3毫升 DW 1000毫升
3 6%葡萄糖溶液: 葡萄糖 6克 DW 1000毫升
以上1、2、3種溶液等量混合即成.
43、指示劑 硼酸二鈉(10H2O) 2.5克 硫乙醇酸鈉 2.4克 美蘭 25毫升 DW 650毫升
44、郭氏培養基
成份: 牛心浸液 10毫升 葡萄糖 1克 酚紅(0.4%) 1.3毫升 1%乙酸鉈 2毫升 調PH8.2-8.3 108℃20分鍾.分裝時加血清或血漿(滅活)20毫升, 0.1%美蘭適量.
45、鞭毛染色法 玻片處理:將玻片用洗衣粉煮沸10分鍾,水洗,再用清潔液浸泡,加溫10分鍾,水洗,再放入95%酒精脫脂,同時取出涼幹,可製成塗片. 染色液的配製: 20%的鞣酸溶液(加溫溶解) 2毫升 鉀明礬飽和液 2毫升 石碳酸飽和液 5毫升 10%堿性複紅無水乙醇溶液 1.5毫升 將上述各液混合後放置2-3日,過濾後備用,此液使用不得超大型過5周.染色步驟: 將細菌接種在瓊脂平板上,培養8-18小時,(35-37℃),用無水乙醇浸泡過的而且幹燥的新玻片加一滴無菌DW,用接種環挑取菌落,置DW液麵上,然後自然幹燥.滴加染色液染1-2分鍾,水洗幹後鏡檢. 結果:鞭毛染成紅色
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