中文版  |   English  |   加入收藏  |   客服熱線:400-0532-596
微生物技術資料
文章檢索
  首頁 > 微生物知識->微生物檢測方法和標準->臨床病原體檢查的常用方法(2)

臨床病原體檢查的常用方法(2)



錄入時間:2011-6-3 10:17:42 來源:檢驗地帶網

㈡病毒感染檢查
 
     1、病毒的形態觀察:光學顯微鏡下隻能觀察到大型病毒(如痘病病毒)和病毒感染後人體細胞胞質或胞核內出現的包涵體,根據包涵體的特點,如巨細胞病毒感染後可在上皮細胞的核內周圍繞有一輪暈似“貓頭鷹眼”樣的嗜酸性包涵體;電子顯微鏡可直接觀察到臨床標本或培養物中有特征性的病毒顆粒,如輪狀病毒、皰疹病毒、冠狀病毒等。
 
     2、病毒培養:由於病毒(virus)是專性細胞寄生,需要在活細胞或動物體內才能分離培養,一般通過活組織培養、雞胚接種和動物接種,最敏感而特異的方法為雞胚接種。根據培養過程或動物接種後的變化特征、流行病學資料和標本來源可進行初步鑒定,有助於確定病毒的種類,但常需結合血清學試驗鑒定。病毒的分離培養與鑒定比細菌更為複雜,一般實驗室較少開展。
 
 
 
     3、病毒抗原檢測:用免疫熒光或免疫酶等技術檢測標本中的特異性病毒抗原,如血清中的乙型肝炎病毒表麵抗原(HBsAg)等。
 
 
     4、分子生物學診斷     ⑴病毒感染的診斷及療效觀察:檢測病毒核酸的序列或特異基因可確定存在病毒核酸,但是否為有感染性的病毒顆粒則有待進一步確認。應用PCR和分子雜交技術可以直接擴增和分析DNA病毒的特異性片段;RNA病毒則應用逆轉錄-聚合酶鏈式反應(RT-PCR)技術,先逆轉錄為cDNA再行PCR擴增後檢測;定量PCR可對標本中的病毒進行量化分析,對病毒感染的診斷和治療觀察有重要意義。例如,患者血清中檢測到乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)是診斷HBV感染最重要的依據。HBV感染後在檢測到HBV表麵抗原(HBsAg)的前2~4周即可查出HBV-DNA,故可診斷HBsAg陰性的HBV感染;通過定量PCR測定血清中HBV的載量(最低檢出量可達20拷貝/ml),可以觀察抗病毒療效;急性乙型肝炎時,HBV-DNA先陽性,治愈後消失;慢性乙型肝炎時,HBV-DNA常持續存在,病毒載量或高或低。
 
 
     ⑵病毒的基因分型:不同病毒的DNA或RNA均有其特異的序列,同一種病毒的核苷酸組成具有一定的同源性,由此可以對病毒進行基因分型。例如:戊型肝炎病毒(HEV)為一種RNA病毒,在全世界發現的病毒株有7個主要基因型,各型之間的核苷酸同源性為74%~76%。 
 
    ⑶流行病學調查:檢測感染病毒的基因型在不同國家或地區的分布特點,有助於分析流行毒株的變化特征。例如,不同地區的HEV基因變異較大,但同一地區的HEV基因序列則相對保守,這對HEV的診斷、研製疫苗、預防感染、臨床治療有重要價值。

 

上一篇:臨床病原體檢查的常用方法(1)

下一篇:臨床病原體檢查的常用方法(3)

首頁 | 關於我們 | 網上商城 | 在線客服 | 聯係我們
業務聯係電話
   400-0532-596 0532-66087773
   0532-66087762 0532-81935169
郵箱:qdhbywg@vip.126.com
地址:青島市城陽區錦匯路1號A2棟
產品技術谘詢
  工作日(周一至周六8:00-18:00):
  18562658263 13176865511
  其它時段:13105190021
投訴與建議:13105190021 13006536294