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埃希菌屬及其實驗室鑒定



錄入時間:2011-6-8 8:57:49 來源:檢驗地帶網

 
     (一)埃希菌屬概念
  埃希菌屬包括5個種,即大腸埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫爾曼埃希菌和傷口埃希菌。臨床最常見的是大腸埃希菌。
  大腸埃希菌俗稱大腸杆菌,大多數菌株是人類和動物腸道正常菌群。
 
     (二)生物學特性(性狀)
  1.形態與染色:為革蘭陰性短杆菌,(1.0~3.0)μm×(0.4~0.7)μm.多數有周鞭毛,能運動。有菌毛、莢膜及微莢膜。
  2.培養特性:兼性厭氧菌,營養要求不高,在普通營養肉湯中呈渾濁生長。普通營養瓊脂上呈灰白色的光滑型菌落。血瓊脂平板上,少數菌株產生溶血環。在伊紅美藍瓊脂上,由於發酵乳糖,菌落呈藍紫色並有金屬光澤。麥康凱和SS瓊脂中的膽鹽對其有抑製作用,耐受菌株能生長並形成粉紅色菌落。
  3.生化反應:吲哚、甲基紅、V-P、枸櫞酸鹽試驗(IMViC試驗)為++--(腸杆菌屬多為--++)。克氏雙糖鐵瓊脂(KIA)上斜麵和底層均產酸產氣,H2S陰性。動力、吲哚、尿素(MIU)培養基的生化反應為++-.
  4.抗原結構:大腸埃希菌的抗原由菌體抗原(O)、表麵抗原(K)和鞭毛抗原(H)三種構成。現已知有171種O抗原,100種K抗原和56種H抗原。一個菌株的抗原類型由特殊的0、K和H抗原的代碼表示,其血清型別的方式是按O:K:H排列,例如O111:K58(B4):H2.
 
 
  (三)致病性
 
  主要是侵襲力、內毒素、腸毒素等致病因素引起各種炎症(如膽囊炎、泌尿係感染、肺炎、新生兒腦膜炎、傷口感染、菌血症及腹瀉等)。內毒素還可引起發熱、休克、DIC等。
 
  1.腸道外感染:主要由正常菌群條件致病,以泌尿係統感染常見,高位嚴重尿道感染與特殊血清型大腸埃希菌有關。如菌血症、膽囊炎、腹腔內膿腫
 
  2.腸道感染:致病性大腸埃希菌有下列五個病原群。
 
  (1)腸產毒型大腸埃希菌(ETEC):引起霍亂樣腸毒素腹瀉(水樣瀉)。
 
  (2)腸致病型大腸埃希菌(EPEC):主要引起嬰兒腹瀉。
 
  (3)腸侵襲型大腸埃希菌(EIEC):可侵入結腸黏膜上皮,引起誌賀樣腹瀉(能產生粘液膿血便)。
  (4)腸出血型大腸埃希菌(EHEC):又稱產誌賀樣毒素(VT)大腸埃希菌(SLTEC或UTEC),其中O157:H7可引起出血性大腸炎和溶血性尿毒綜合征(HUS)。臨床特征為嚴重的腹痛、痙攣,反複出血性腹瀉,伴發熱、嘔吐等。嚴重者可發展為急性腎衰竭。
 
  (5)腸粘附(集聚)型大腸埃希菌(EAggEC):也是新近報道的一種能引起腹瀉的大腸埃希菌。
 
  3.CDC將大腸埃希氏菌O157:H7列為常規檢測項目
  EHEC的血清型>50種,最具代表性的是O157:H7.在北美許多地區,O157:H7占腸道分離病原菌的第二或第三位,是從血便中分離到的最常見的病原菌,分離率占血便的40%,6、7、8三個月O157:H7感染的發生率最高。且0157是4歲以下兒童急性腎功衰的主要病原菌,所以CDC提出應將大腸埃希氏菌0157:H7列為常規檢測項目。
 
      (四)微生物學檢驗
 
  1.標本采集:腸道感染可采集糞便;腸道外感染可根據臨床感染情況采集中段尿液、血液、膿汁、膽汁、腦脊液、痰、分泌液等。
 
  2.檢驗方法及鑒定
  (1)塗片與鏡檢:膿汁及增菌培養物發現單一革蘭陰性杆菌,可初步報告染色、形態、性狀供臨床用藥參考。
  (2)分離培養:糞便標本可用弱選擇鑒別培養基進行分離,膿汁等可用血平板分離,取可疑菌落進行形態觀察及生化反應。
  (3)鑒定
  1)初步鑒定:根據菌落特征,塗片染色的菌形及染色反應,取純培養物作生化反應。凡符合KIA:A/A或K/A、產氣或不產氣、H2S-;MIU:動力+或-、吲哚+、脲酶-;氧化酶-,IMViC:++--,可鑒定為大腸埃希菌。
  2)致病性大腸埃希菌:
  EPEC的鑒定:
  EIEC的鑒定:應與誌賀菌相鑒別,兩者的主要鑒別試驗可用醋酸鈉和葡萄糖銨利用試驗及粘質酸鹽產酸三種試驗。大腸埃希菌均為陽性,而誌賀菌均為陰性。
  ETEC毒素的檢測:采用改良Elek法測定LT並采用乳鼠胃內灌注法檢測ST.
 
 
  EHEC的血清學鑒定:
 
  EAEC的鑒定:檢測細菌對HEP-2細胞或Hela細胞的粘附性。
腸道外感染,經塗片染色,分離培養後,生化鑒定到種;由於大腸埃希菌是超廣譜β-內酰胺酶(ESBLs)的主要產酶株,該酶由質粒介導。對ESBLs產酶株所致感染需要采用碳青酶烯類或內酰胺類抗生素/酶抑製劑或頭黴菌素類進行治療。腸道內感染還需做血清分型、毒素測定或毒力試驗。食物、飲料、水等衛生細菌學檢查,主要進行大腸菌群指數檢測。

 

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