血漿凝固酶試驗是葡萄球菌屬鑒定中的關鍵試驗,但其準確性始終未能很好解決。
目前公認用兔血漿較好,但許多實驗室用病人血漿或血庫血漿來代替,在一定程度上影響了結果的準確性。
病人血漿中含有各種抗體、藥物;某些病人血漿中纖維蛋白含量低下;各種不同抗凝劑的影響;血漿被汙染;如操作不當有感染疾病的危險。
試管法凝固酶試驗檢測葡萄球菌凝固酶,玻片法檢測凝聚因子。有10%一15%金黃色葡檢驗地帶網萄球菌呈假陰性,因此必須用試管法驗證凝聚因子試驗。
玻片法檢測凝聚因子試驗操作過程中的注意點: 10s內觀察結果。 必須製備濃厚的均勻菌懸液。 加血漿後不要再混攪,以免細菌凝塊分散變小。 生長在高鹽培養基上的菌落可出現自凝或假陽性。
介紹一種兔血漿製備方法:市售健康食用兔以無菌操作抽血,每毫升血液用EDTA·K2·2H2O2mg抗凝,3000r/min,10min離心分離血漿,分裝於無菌小試管,每管血漿0.1ml+0.9%生理鹽水0.4ml,混勻加塞蓋,貯藏於2℃-8℃(45天後失效);-20℃和-85℃(第6個月結果不變)。一隻兔可製備300份,使用時無需稀釋,直接應用,方便簡單。
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