1. 預先製備H5基因表達細胞片.
2. 用PBS輕洗細胞一次.
3. 用預冷(-20oC) 的甲醇固定細胞20分鍾.
4. 風幹片子(此片可在低溫長期保存待用).
5. 用PBS浸泡細胞片20分鍾.
6. 吸去PBS, 加抗血清/抗體(稀釋度可根據具體情況而定). 體積要足夠蓋過細胞表麵.
7. 37oC 溫箱45分鍾到一個小時.間中搖動.
8. PBS 洗三次,每次15分鍾,室溫,搖動.
9. 吸去PBS,加第二抗體(抗人或抗禽,根據第一抗體而定), 稀釋度1:100至1:200, 可根據第二抗體濃度而定. 體積要足夠蓋過細胞表麵.
10. 37oC 溫箱45分鍾到一個小時, 間中搖動.
11. PBS 洗三次,每次15分鍾,室溫,搖動.
12. 吸去PBS,加覆蓋液, 蓋玻片,用指甲油封邊.
13. 鏡檢.
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