一、先配製1M的MgSO4: MgSO4·7H2O 2.46g 加雙蒸水10ML溶解，高壓滅菌備用；
二、配製1M的Cacl2: Cacl2·6H2O 2.191g 加雙蒸水10ML溶解，高壓滅菌備用；
三、再配製5×M9鹽溶液：
Na2PO4·7H2O 12.8g
KH2PO4 3.0g
Nacl 0.5g
NH4cl 1.0g
加雙蒸水200ml溶解，121度滅菌15分鍾，
備注：以上三樣分別配製，分別裝瓶，可以一起送去高壓。
四、配製20%的葡萄糖溶液：4g葡萄糖加雙蒸水20ml溶解，0.22微米濾器過濾除菌；
五、無菌操作配製M9培養基
5×M9鹽溶液 200ml
1M的MgSO4 2ml
20%的葡萄糖溶液 20ml
1M的Cacl2 0.1ml
加滅菌雙蒸水至1000ml
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