範圍:本法適用於濃縮果汁及濁汁中細菌總數的檢測。濃縮果汁通過濾膜過濾,細菌被截留,而後將濾膜置於細菌總數選擇性培養基中,培養確定細菌總數的數量。濁汁直接與平板計數培養基混合後培養來確定細菌總數的數量。
參考:GB/T 4789.2-2003
標準:無
試劑:
Millipore細菌總數選擇性培養基
平板計數瓊脂
乙醇(75%)
儀器器皿:
培養箱
淨化工作台
滅菌Duran Schott 瓶
10毫升無菌移液管
Millipore過濾器
PALL 0.45μm濾膜
PALL 一次性無菌培養皿50×9mm,內置吸水紙
一次性無菌培養皿90×15mm,塑料
真空泵
菌落計數器
鑷子
酒精燈
漏鬥
操作程序
全部工作應在已經紫外線殺菌15分鍾及75%乙醇噴灑過的淨化工作台上進行。
1清汁的檢測
1.1用無菌移液管從無菌袋中吸取20mL果汁,置於盛有50mL滅菌水的樣品瓶中,充分混勻。將一瓶細菌總數選擇性培養基倒入50×9mm的一次性無菌培養皿內。
1.2用無菌鑷子夾取一個濾膜邊緣部分,正麵向上置於滅菌過濾器上,將製備的樣品倒入漏鬥內,打開真空泵,當全部液體通過膜後,釋放真空,用鑷子把濾膜輕輕夾起,放於預備的培養皿內。
1.3將培養皿置於培養箱內,於30~35℃培養三天。
1.4全部的細菌總數用放大鏡計數。此數目除以20即得出每毫升果汁中的細菌菌群數。
2濁汁的檢測
2.1用無菌移液管吸取10mL已熱處理過的果汁,分別備5個無菌培養皿內各加入2mL果汁,向每一90×15mm的無菌培養皿中迅速傾入平板計數瓊脂約25mL,輕輕搖動,使果汁與培養基混合均勻。
2.2待培養基凝固後,將培養皿倒置放入培養箱內,於30-35℃培養三天。
2.3培養結束,進行計數,以每10mL樣品報告結果。
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