無菌操作環節
（1）接種室應保持清潔，用煤粉酚皂液擦洗台麵及牆壁，定期用乳酸或甲醛熏蒸。每次使用前，均應用紫外燈滅菌。定期對接種室作無菌程度的檢查。
（2）進入接種室前，應先做好個人衛生工作，在緩衝間內要更換工作鞋帽、工作衣、戴口罩。工作衣、工作鞋、口罩隻準在接種室內使用。不準穿到其它地方去，並要定期更換、消毒。
（3）接種的試管、三角並瓶等應做好標記，注明培養基、菌種的名稱、日期。移入接種室內的所有物品，均須在緩衝室用70%酒精擦試幹淨。
（4）接種前，雙手用70%酒精或新潔爾消毒，操作過程不離開酒精燈火焰；棉塞不亂放；接種工具使用前後均需火焰滅菌。
（5）培養箱應經常清潔消毒。
接種室的消毒方法
1、紫外線滅菌
接種室使用前打開紫外燈照射約30分鍾，就能使空氣和室壁表麵基本上無菌。為了加強滅菌效果，在開燈以前可以在接種內噴灑石炭酸溶液，使空氣中附有微生物的塵埃降落，並殺死一些微生物。接種室的台麵等，可以用2-3%的來蘇爾擦洗。
紫外線對人體皮膚，尤其對眼睛具有殺傷力，因皮不要直視開著的紫外燈，也不能在開著燈的情況下工作。
2、噴灑石炭酸
將石炭酸水浴，稍熱，使之溶解。用吸耳球通過吸管吸取該溶液，配成5%溶液。對於小房間，可用噴霧器由上至下、由裏至外順序進行噴霧，並門，稍等片刻即可使用。石炭酸對皮膚有較強的毒害作用，使用時不要接觸皮膚。
3、福爾馬林熏蒸
（1）用量：市售福爾馬林是37-40%的甲醛水溶液。常用量按每立方空間2-6ml計算。
（2）熏蒸方法：用福爾馬林熏蒸有兩種方法：
①加熱熏蒸：按熏蒸空間計算,量取甲醛溶液,放在酒精燈上方的小鐵筒或燒杯中,點燃酒精燈,關閉室門。酒精燈最好在甲醛蒸完後即自行熄滅。
②氧化熏蒸：在一瓷杯裏鋪一張報紙，放入高猛酸鉀（其用量為1/2甲醛量），再取定量的甲醛溶液，倒在盛有高猛酸鉀的容器裏，立即關門。幾秒鍾後，由高猛酸鉀氧化甲醛反應所產生的熱將其餘的甲醛蒸為氣體。
由於甲醛對人眼、鼻有強烈的刺激作用，熏蒸後相當時間內不能進入室內工作。因此，接種室至少在使用前24小時進行熏蒸，房間應密閉，保持12小時。之後可取與甲醛等更是的氨水，倒在一個瓷碗裏，放入熏蒸過的接種室，以減少甲醛對人的刺激作用。用氨水中和，至少應在工作前2小時進行。
4、過濾除菌
近幾年來，多采用一種稱之為超淨工作台的接種室，其原理是借助於一鼓風機將普通空氣鼓入，通過粗濾、超濾纖維過濾後，進入工作台內的空氣即為無菌空氣。整個工作室內要求清潔無塵，這樣可延長超淨工作台的使用壽命。
新的超淨工作台使用前，要進行無菌試驗，確定合格方可使用，接種前，應先將工作台開啟5-6分鍾。
接種室無菌程度檢查
取無菌的營養瓊脂平板，在接種室內台上和台下各放一套，把皿蓋打開15min，然後蓋好，倒置37℃恒溫培養24-28小時，如果每個皿內菌落不超過4個，則可以認為無菌程度良好，若菌落很多，則應對接種室進一步滅菌。
上一篇：微生物的接種、分離和培養以及無菌操作
下一篇：細菌和噬菌體的遺傳分析（1）
