目的要求
1. 通過觀察了解酵母細胞的形態結構。
2. 掌握鑒別酵母細胞死活的染色方法。
材料
1. 菌種:酵母菌菌懸液。
2. 染料:0.1%美蘭染色液。
3. 其他:顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、試管、蒸餾水等。
原理
酵母菌細胞較大,不必染色即可用顯微鏡觀察其形態。
用美蘭染色液可對酵母細胞進行死活染色鑒別。美蘭是一種弱氧化劑,氧化態呈藍色,還原態呈無色。活的酵母細胞,因新陳代謝的不斷進行,具有一定的還原能力,能將進入細胞的美蘭還原,而細胞不被染色。因此,用美蘭對酵母細胞染色一定時間後,無色的為活細胞,呈藍色的則為死亡細胞。需要注意的是,一個活酵母菌的還原能力是一定的,必須嚴格控製染料的濃度和染色時間。
方法
1.酵母菌細胞形態的觀察
取潔淨的載玻片一塊,用滴管取酵母菌懸滴於載玻片中央,取蓋玻片一塊,小心地將蓋玻片一端與菌液接觸,然後緩慢地將蓋玻片放下,以避免產生氣泡。至此,一片酵母菌水浸標本片就製成了。
先用低倍鏡觀察,再用高倍鏡觀察,觀察時注意酵母細胞的形狀及出芽情況。
2.死活酵母細胞的染色鑒別
取0.1%美蘭液一滴,滴在一塊潔淨的載玻片中央,加一滴酵母菌懸液,混合均勻,染色3~5分鍾後加蓋玻片製成水浸標本片,鏡檢。
內容
1. 製片觀察所給各種酵母菌的細胞形態。
2. 用美蘭液對酵母菌死活細胞進行染色鑒別。
結果與思考題
1. 繪圖表示所觀察的各種酵母菌,注明菌名及放大倍數。
2. 用美蘭對酵母細胞進行染色鑒別時,為什麽要控製染料的濃度和染色時間?
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