有些病毒，能凝集某種動物的紅血球，故可以此來推測材料中有無該病毒的存在。
如有能凝集血球的病毒，其凝集性可為相應的抗體抑製，這種抑製具有特異性，故病毒的血球凝集抑製試驗，可用已知病毒來檢查被檢血清中的相應抗體，也可用已知血清來鑒定未知病毒。
由於隻是一些病毒有血凝性，故血凝或血凝抑製試驗隻能用於那些有血凝性的病毒。
現以新城疫病毒為例。
（一）需要材料
1．病毒 弱毒的雞新城疫疫苗，通過雞胚繁殖後所收獲的絨毛尿囊液。
2．已知陽性血清 將弱毒苗初次免疫雞後，以後每周肌肉注射按規定稀釋好的疫苗1ml，四次。末次注射後2周，心髒采血，分出血清，血凝抑製價可超過1:1280，加硫柳汞後在冰箱中可保存5年以上。
3．被檢血清 從被檢雞的翅靜脈或心髒采血，分出血清。
4．雞血球 采雞血，抗凝，洗血球，配製成0.5％雞血球生理鹽水液。
（二）操作方法
1．微量紅血球凝集試驗（HA）
（1）用定量稀釋器於每排各孔中加PBS0.05ml。
（2）以稀釋器吸取1：5稀釋的抗原0.05ml於第一孔，反複擠壓3～5次後，吸0.05ml於第二孔，依次倍比稀釋至第11孔；棄去0.05ml。第十二孔不加抗原作為對照。
（3）再用帶新塑料吸嘴的稀釋器吸取0.5％紅血球懸液依次加各孔，每孔0.05ml。
（4）置微量振蕩器上振蕩1分鍾，或用手輕輕搖振，混勻。
（5）置室溫下（18～20℃）作用30～40分鍾。
依據血球凝集程度判定反應結果，以出現完全凝集的抗原最大稀釋度為該抗原的血球凝集效價。
2．微量紅血球凝集抑製試驗（HI）
能凝集紅血球的病毒，其凝集性可為相應的抗體所抑製，這種抑製具有特異性，稱為紅血球凝集抑製試驗。病毒的血球凝集抑製試驗，可用已知的血清來鑒定未知病毒（即α－血球凝集抑製試驗），也可以用已知病毒來檢查被檢血清中的相應抗體（即β－血球凝集抑製試驗）。其中以β－微量法紅血球凝集抑製試驗最常用。
β－微量法HI試驗多在96孔微量反應板上進行，具體操作(表20-2)為：
（1）用定量稀釋器取PBS0.05ml，加入每一排的第1孔，8個血凝單位濃度的抗原0.05ml於第2孔，再取濃度為4個血凝單位的抗原0.05ml依次加入第3～12孔。
（2）用定量稀釋器吸取待檢血清0.05ml於第1孔中，反複混勻後吸0.05ml於第2孔，依次倍比稀釋至第11孔，最後棄去0.05ml，第12孔不加血清，作抗原對照。
（3）置室溫下作用20分鍾。
（4）加0.05ml0.5％紅血球懸液於各孔中，輕輕振蕩混勻後，置室溫下30～40分鍾。
依據血球凝集抑製程度判斷結果。以完全抑製紅血球凝集的血清最大稀釋度為該血清的血球凝集抑製效價。如果以2為底的負對數（-log2）表示，其血凝抑製效價恰好與反應板上出現完全抑製的最高孔數相一致。
上一篇：病毒學實驗技術（5）
下一篇：偽狂犬病病毒
