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細菌呼吸酶類試驗



錄入時間:2011-8-26 10:18:05 來源:青島betway必威西汉姆联

 

1.氧化酶試驗  氧化酶或稱細胞色素氧化酶,是細胞色素呼吸酶係統的終末呼吸酶。作氧化酶試驗時,此酶首先使細胞色素C氧化,然後氧化型細胞色素C再使對苯二胺氧化,產生顏色反應。本試驗腸杆菌科陰性,弧菌科、非發酵菌陽性(除個別菌種外)、奈瑟菌屬均陽性。

2.過氧化氫酶試驗  黃酶係統的呼吸酶最後把氫交給分子氧而形成過氧化氫,過氧化氫對活細胞有毒,過氧化氫酶的作用是使過氧化氫分解為分子態氧。於半分鍾內大量氣泡產生者為陽性,不產生氣泡者為陰性。絕大多數細菌均可產生過氧化氫酶。但鏈球菌屬的觸媒陰性,金氏杆菌屬細菌的觸媒也陰性。

3.硝酸鹽還原試驗   硝酸鹽還原試驗包括兩個過程:其一是在合成代謝過程中,硝酸鹽還原為亞硝酸鹽和氨,再由氨轉化為氨基酸和細胞內其它含氮化合物;其次是在分解代謝過程中,硝酸鹽或亞硝酸鹽代替氧作為呼吸酶係統中的終末受氫體。硝酸鹽還原的過程可因細菌不同而異,大腸埃希菌等僅使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽;假單胞菌等能使硝酸鹽或亞硝酸鹽還原為氮;有的細菌則可使其還原為亞硝酸鹽和離子態的銨。硝酸鹽或亞硝酸鹽如果還原生成氣體的終末產物如氮或氧化氮,就稱為脫硝化或脫氮化作用。硝酸鹽還原試驗係測定還原過程中所產生的亞硝酸.接種硝酸鹽培養基後於35℃培養1~4d,將硝酸鹽還原試劑甲液和乙液的等量混合液(用時混合)0.1ml加於試管內,立即或10min內觀察結果。(1)出現紅色為陽性。(2)如欲檢查有無氮氣產生,可於培養基內加1隻小倒管(Durham管),如有氣泡產生,表示有氮氣生成。(3)如加入硝酸鹽還原試劑不出現紅色,需檢查硝酸鹽是否被還原,可於原試管內再加入少許鋅粉,如出現紅色表示硝酸鹽仍然存在。若仍不產生紅色,表示硝酸鹽已被還原為氨和氮。腸杆菌科細菌均能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽,銅綠假單胞菌、嗜麥芽假單胞菌等可產生氮氣。

 

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