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食源性致病菌檢測技術(3)



錄入時間:2011-8-31 9:55:02 來源:食品夥伴網

 

變形杆菌

    變形杆菌是腸杆菌科的一類細菌。在一定條件下可引起各種感染與食源性疾病。此菌在食物中能產生腸毒素。致病食物以魚蟹類為多。近年來,變形杆菌食物中毒有相對增多趨勢。 

1.常規分離鑒定技術

    將獲得的標本迅速接種於血平板、EMBSS等平板上以37培養18-24小時,多數菌株在血平板、EMB平板上呈擴散蔓延薄膜狀生長,並使血平板變黑發臭。在SS5%瓊脂平板上可形成單個菌落。方法見衛生部《變形杆菌食物中毒診斷標準和處理原則》WS/T9-1996 

    交互吸收試驗:將不同標本中分離獲得的菌株分別免疫家兔,製備抗血清,做交互凝集試驗。 

    Dienes試驗:將不同標本中分離獲得的菌株分別點種在表麵幹燥的普通營養瓊脂平板或血瓊脂平板上,以37培養18-24小時觀察結果,如果兩株菌落互相融合生長,認為是相同的菌株。如果兩株菌落之間出現明顯的分界線,說明是不同菌株。

    抗蔓延試驗:將菌株免疫家兔獲得抗血清,然後按一定的比例將抗血清加入於已融化並冷卻約56的瓊脂培養基中,混合均勻,傾注平板。待凝固後分別點種於平板上,37培養18-24小時。如果形成單個菌落,說明該菌株與製備抗血清的菌株是相同的。 

    雙份血清定量疑集試驗:將分離獲得的菌株做成適當濃度(約1010/ml)的菌液,然後分別與患者發病初期(1-3天)與恢複期(12-15天)的雙份血清,進行試管定量疑集試驗,恢複期血清的疑集價有4倍或以上的增加具有流行病學意義。 

2.流行病學分型技術

    血清分型:用已知的標準血清進行血清分型,從患者分離獲得的菌株與其他標本獲得的菌株應屬於同一血清型。 

    噬菌體分型:從汙水中分離的變形杆菌菌株中獲得的溫和噬菌體可以裂解普通變形、奇異變形杆菌,並可以分型。 

    變形杆菌脈衝場電泳(PFGE)分子分型:Sabbuba2003年)用NotI-PFGE技術對醫院環境和病人的54株奇異變形杆菌進行分型,有52株可分為不同的脈衝型,並於經典的Dienes分型法進行了比較,NotI-PFGE技術有更強的區分能力。

 

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