取腺病毒以m.o.i=5病毒量感染293細胞,待細胞病變達+++~++++時收獲。
沉澱細胞加2m1 TE重懸,分裝四個1.5ml Eppendorf管,
每管加蛋白酶K(20μg/μl)7μl和10% SDS 50μl,37 C孵育1 h,
再加5mol/L NaCI 150μl置於4℃反應2ho 13,000rpm離心30min,
轉移上清,用等體積酚、酚一氯仿/異戊醇、氯仿/異戊醇各抽提一次,
抽提上清加入1/10體積2.5mol/L的乙酸鈉(pH5.2)和2倍體積無水乙醇,置-20℃ 30min或O/N。
13,000rpm離心l0min棄上清,
75%乙醇洗兩遍,於室溫晾幹後,每個1.5m1 Eppendorf管加50μl TE溶解。
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