大腸杆菌質粒DNA的提取（堿裂解法）
此方法適用於小量質粒DNA的提取提取的質粒DNA可直接用於酶切PCR擴增。
1 ). 取1.5ml細菌培養物於EP管中，4000rpm離心1分鍾，棄上清液，使細菌沉澱盡量幹燥；
2 ). 將細菌沉澱重懸於用冰預冷的100 µl溶液I (50 mmol/L葡萄糖，10 mmol/L EDTA pH 8.0，25 mmol/L Tris-HCl pH 8.0) 中，劇烈振蕩；
3 ). 加入200 µl新配製的溶液II(0.2 mol/L NaOH，1％SDS（m/v）)，蓋緊EP管口，快速顛倒離心管5次，以混合混合物，確保離心管的整個內表麵與溶液II接觸，不要渦旋，置於冰浴中；
4 ). 加入150 µl預冷溶液III(每100 ml 的溶液III中含60 ml 5 mol/L 乙酸鉀，11.5 ml冰乙酸，28.5 ml H2O)，蓋緊EP管口，反複顛倒數次，使溶液III在粘稠的細菌裂解物中分散均勻，之後將管置於冰上3~5分鍾；
5 ). 在最大轉速下離心5min，取上清液於另一新EP管；
6 ). 用兩倍體積的乙醇室溫沉澱雙鏈DNA，振蕩混合於室溫放置2分鍾，最大轉速離心5分鍾；
7 ). 小心吸去上清液，將離心管倒置於濾紙上，以使所有液體都流出，在將附於管壁的液滴除盡；
8 ). 加1ml 70％乙醇洗滌沉澱，振蕩混合，用12,000g離心2分鍾，棄上清，將開口的EP管置於室溫使乙醇揮發，直至EP管中內沒有可見的液體存在（5～10分鍾），用適量的ddH2O溶解；
9 ). 用0.5µl的RNase 37℃溫育5~10分鍾；
10 ). 電泳鑒定。
