烏梅對308株臨床菌株的抑菌效果

【關鍵詞】  烏梅；金黃色葡萄球菌；表皮葡萄球菌；腸球菌；大腸杆菌；瓊脂稀釋法

　　Abstract：Objective To observe antibacterial efficiency of Prunus mume Sieb et Zucc against clinical isolates. Method Antibacterial activity of Prunus mume Sieb et Zucc against 308 strains of clinical isolates were determined by agar dilution method. Results MIC50 of Prunus mume Sieb et Zucc against staphylococcus aureus (112 strains), S.epidermidis (112 strains), and Enterococci (28 strains) were 0.72, 1.44, 0.72 mg/mL, and MIC90 were 1.44, 1.44, 0.72 mg/mL respectively. The MIC90 of Prunus mume Sieb et Zucc to Klebsiella pneumoniae and E. coli were 2.88, 1.44 mg/mL respectively. Conclusion Prunus mume Sieb et Zucc has good antibacterial activity against Gram positive cocci and some Gram negative bacilli.

　　Key words：Prunus mume Sieb et Zucc；staphylococcus aureus；S.epidermidis；enterococci；E. coli；agar dilution method

    烏梅抗菌作用有許多報道,1959年山東醫學院微生物教研組報道,50%烏梅水煎劑對金黃色葡萄球菌有抑製作用[1]；1960年中國醫學科學院藥物研究所[2]報道,100%烏梅水煎劑對金黃色葡萄球菌的抗菌作用最強；1960年重慶醫學院第一附屬醫院[3]報道,100%烏梅水煎劑對金黃色葡萄球菌無抑菌作用；趙氏等[4]報道；烏梅對腦膜炎球菌的抑菌環為20 mm；1992年周氏等[5]報道；烏梅對淋球菌的抑菌環為17～26 mm；1993年又報道對小腸結腸炎耶氏菌的抑菌環為≥27 mm[6]。上述報道大多為定性實驗,一般使用1株菌株,所使用培養基也多為營養瓊脂,所以其結果往往缺乏代表性。為此,我們采用瓊脂稀釋法,對烏梅進行308株臨床菌株的抗菌作用檢測。現報道如下。

　　1  實驗材料

　　1.1  儀器

　　微量多點接種儀,北京醫科大學昆侖藥物發展研究所生產。

　　1.2  培養基

　　Mueller-Hinton瓊脂(美國BD公司,BBL,簡稱M-H瓊脂)。

　　1.3  藥物

　　烏梅購自河北省藥材公司。先將烏梅按常法做成煎液,即100 g烏梅文火煎後做成200 mL煎液(為50%烏梅煎液),備用。

　　1.4  菌種

　　從本院臨床患者的血液、尿液、膿汁、痰等標本分離的菌株共308株,其中金黃色葡萄球菌112株,表皮葡萄球菌112株,腸球菌28株,肺炎克雷伯菌和大腸杆菌各28株。均按標準予以鑒定[7]。

　　2  實驗方法

    采用瓊脂稀釋法對烏梅進行定量抗菌實驗。

　　2.1  藥液稀釋

　　排列無菌中試管10隻,於2～10隻管中加無菌蒸餾水10 mL,取50%(1∶2)烏梅水煎液20 mL,於第一管加入10 mL,第2管加入10 mL,於第2管混合後取出10 mL,加入第3管,再混合後取10 mL放入第4管,如此連續稀釋至第9管取出10 mL棄掉。第10管隻有無菌蒸餾水作對照。這樣1～9管中含有不同濃度藥液各10 mL。

　　2.2  含藥平板製備

　　將已溶化的無菌M-H瓊脂900 mL分裝於10瓶,每瓶90 mL,將第1管含10 mL 50%的烏梅水煎液放入含90 mL培養基的瓶中,混合後傾注4個平板,每個平板含25 mL含藥瓊脂,第2管以後的平板製備同第1管,凝固後備用。這樣第1組的瓊脂平板實際含烏梅5%(1∶20),第2組為1∶40,第3組為1∶80。

　　含藥培養基的藥物濃度計算：將一定量(50 mL或100 mL)、一定比例(1∶2或1∶4)的原藥材水煎液於37 ℃溫箱中烘幹,稱重,求出每1 mL水煎液的實際重量,就可算出每1 mL培養基中水煎藥液幹重量。如每100 mL 50%烏梅煎液幹重為11 500 mg,第1組每100 mL含藥培養基含有煎液10 mL,那麽每1 mL培養基含煎液幹重則為：11500×10＝11.5(mg)

　　所以第1組含藥培養基實際含煎劑幹重為11.5 mg/mL,因倍量稀釋,故第2組含藥培養基為第1組數被2除即可。烏梅水煎劑即：1∶20＝11.5 mg/mL,1∶40＝5.75 mg/mL,1∶80＝2.88 mg/mL……。

2.3  菌液製備

    將金黃色葡萄球菌等新鮮培養物(菌落)製成菌液,濃度相當於0.5麥氏比濁管。

　　2.4  指標檢測   

　　用多點接種儀分別吸取各種菌液並將其點種於含不同藥物濃度瓊脂平板上。於35 ℃培養18～24 h,觀察最低抑菌濃度(MIC),並統計出MIC50和MIC90的藥物濃度和累積抑菌百分率。

　　3  結果   

　　烏梅水煎劑對308株臨床菌株抑菌實驗結果表明,烏梅不僅對金黃色葡萄球菌等革蘭陽性球菌有較好的抑菌作用,對金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腸球菌的MIC90分別為1.44、1.44、0.72 mg/mL；而且對肺炎克雷伯杆菌和大腸杆菌的抑菌結果也很好,其MIC90分別為2.88和1.44 mg/mL(見表1)。烏梅對308株臨床菌株的累積抑菌率見表2。表1  烏梅對308株臨床菌株的抑菌情況（略）表2  烏梅對308株臨床菌株的累積抑菌率（略）

　　4  討論   

　　烏梅具有斂肺止咳、澀腸止瀉等功效,其抗菌作用研究表明對多種細菌有抑製作用。本次研究結果表明,烏梅對308株臨床菌株的抑菌效果均較好,不僅對革蘭陽性球菌抑菌效果較好,而且對革蘭陰性杆菌的抑菌效果也較好,如烏梅水煎劑幹重的1.44 mg/mL(1∶160稀釋)則使28株大腸杆菌100%受到抑製,這在中藥之中較為少見。   

　　許多中藥對革蘭陽性球菌抑菌效果較好,但是對革蘭陰性細菌尤其是帶鞭毛的革蘭陰性杆菌的抑菌作用較差,而烏梅則具有抑製革蘭陽性球菌和革蘭陰性杆菌的廣譜抑菌活性。

作者：李仲興,王秀華,趙建宏,楊敬芳,李繼紅

【參考文獻】

  　　[1] 山東醫學院微生物教研組.110中藥抗菌譜試驗的初步結果[J].山東醫學院學報,1959,(8)：42－45.

　　[2] 中國醫學科學院藥物研究所.545種中藥的抗菌作用篩選[J].藥學通報,1960,(2)：59－63.

　　[3] 重慶醫學院第一附屬醫院.192種中藥及草藥抗菌作用研究[J].微生物學報,1960,8(1)：52－58.

　　[4] 趙宗越,何曉青,謝玉昆.26種中藥對腦膜炎球菌的抑菌試驗[J].微生物學報,1960,8(2)：171－173.

　　[5] 周邦靖,張友菊,張曉玲.148種中藥對淋球菌抗菌作用的實驗觀察[J].浙江中醫雜誌,1992,27(8)：370.

　　[6] 周邦靖,徐有穗.160種中藥對小腸結腸炎氏菌的抗菌作用[J].成都中醫學院學報,1993,16(4)：36－37.

　　[7] Murray PR. Manual of clinical microbiology[M]. 8th. Washhington DC：American Society for microbiology,2003.331－333,384－404.

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