【摘要】 目的：建立注射用炎琥寧細菌內毒素檢查方法。方法：按《中國藥典》2005年版(二部)附錄收載的細菌內毒素檢查方法及指導原則進行實驗。結果：注射用炎琥寧經1→40倍稀釋後對鱟試劑無幹擾作用。結論:細菌內毒素檢測方法可用於注射用炎琥寧的熱原檢查。
【關鍵詞】 細菌毒素 鱟試劑 炎琥寧 HtPot10恒溫金屬浴
注射用炎琥寧具有清熱、解毒、抗炎的功能，臨床應用於病毒性肺炎、病毒性上呼吸道感染。臨床用藥廣泛，又常用於靜脈滴注，現標準為進行熱原檢查［１］，由於細菌內毒素檢查具有靈敏度高，操作簡便，重現性好的優點。現將細菌內毒素法代替熱原檢查法。
1 儀器與試劑
混勻器；HtPot10恒溫金屬浴(合肥艾本森科學儀器有限公司)；無熱原吸頭，微量移液器。
細菌內毒素工作品(CSE，效價70EU/支，批號20053，中國藥品生物製品檢定所)；鱟試劑(TAL，靈敏度0.125EU/ml，批號051109，050210，湛江安度斯生物有限公司)；細菌內毒素檢查用水(批號200050208，含量≤0.03EU/ml，湛江海洋生物製品檢定廠)；注射用炎琥寧(供試品，規格每支0.2g，批號051209、0501018、050926，哈爾濱三聯藥業有限公司)。
2 方法與結果
2.1 鱟試劑靈敏度(λ)複核 按細菌內毒素檢查法［２］，用BET水將細菌內毒素工作標準品稀釋成2、1、0.5、0.25λ4個濃度進行實驗。結果表明，靈敏度為0.125EU/ml的鱟試劑符合規定。見表1。將表1數據代入公式λc=lg-1∑xini λc=0.125。表1 鱟試劑靈敏度複核實驗結果（略）
2.2 注射用炎琥寧細菌內毒素限值(L)的確定 L=K/M，式中K為規定的給藥途徑，人用每千克體重每1h可接受的內毒素最大劑量，注射劑的K=5.0EU/kg·h；M為人用每千克體重每1h給藥的最大劑量，經計算，供試品M=1.0ml/kg·h，因此細菌內毒素理論限值為：L=K/M=5/1.0=5EU/ml。
2.3 供試品的最大有效稀釋倍數(MVD) 選用靈敏度為0.125EU/ml鱟試劑時，MVD=Lλb=50.125=40倍。
2.4 供試品幹擾初篩試驗 用BET水將注射用炎琥寧(批號051209)分別稀釋成原液、1→10、1→20、1→40係列濃度，以各稀釋濃度供試品將細菌內毒素工作標準品稀釋成2、1、0.5、0.25λb4個濃度的內毒素溶液，與鱟試劑混合進行抑製/增強試驗，結果表明，供試品在較高濃度時對鱟試劑有幹擾作用，之外，其直接毒性作用可刺激心血管、肝髒等髒器與功能，是導致肝細胞局灶或彌漫性壞死的主要原因。肝細胞可出現局灶或彌漫性壞死，門脈周圍纖維化。在供試品至少1→40稀釋後則對鱟試劑無幹擾作用，
3小結
注射用炎琥寧為中藥注射液，為大分子物質。在預試驗中，供試品的原液、1-10、1-20稀釋液對標示靈敏度為0.5EU/ml和0.25EU/ml的鱟試劑有抑製作用，故選擇標示靈敏度為0.125EU/ml或靈敏度更小的鱟試劑。由本試驗可知，隻需將供試品至少1-40稀釋，對鱟試劑的抑製作用即消失。
不同鱟試劑對供試品的反應有差異。本實驗采用兩種不同癖好的鱟試劑同時進行試驗，得到了較為滿意結果。
本試驗結果證實，細菌內毒素檢查法可替代注射用炎琥寧的熱源檢查，檢查時隻要將至少1-40稀釋，選擇相應靈敏度的鱟試劑即可進行。
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