先用肉湯培養基複活，此為菌種第一代；從營養肉湯培養物中挑菌液劃相應的選擇性培養基平板，選擇典型菌落，接種於營養瓊脂斜麵，此為菌種第二代；一個月後，從斜麵上挑菌劃相應的選擇性培養基平板，選擇典型菌落，接種於營養瓊脂斜麵，此為菌種第三代；依次下去，直至第五代，就可以不再接了，可以買新的菌種了。
1.選擇複活用的培養基,可選用說明書中推薦的培養基,根據菌株的分類進行選擇,請說明購買菌株的類型或名稱；
2.選擇菌株保存的方法：冷凍真空幹燥保藏法(可保存10年以上，需真空冷凍幹燥機等設備)、超低溫保藏(可保存兩年左右，但需有-80℃冰箱)、定期移植保藏法(可保存1-6月) ，請根據實際情況進行選擇；
3.準備需要的培養基、保存管、甘油、尖頭吸管(有時常規吸管太粗，無法深入菌種管底部)、開啟工具等；
4.無菌開啟菌種管，將管內幹粉溶解轉入相關培養基，培養後選擇保存菌種的代數；
5.進行驗證實驗(革蘭氏染色、菌落形態、生化試驗、血清試驗或其他鑒定係統等)，確認後保存菌種，注意整個過程的無菌操作。
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