對流免疫電泳也稱為免疫電滲電泳，抗原在堿性緩衝液(大於等電點pH8.2 以上)中帶負電，在電場中向正極移動；而抗體球蛋白接近於等電點，借電滲液流的作用與抗原的遷移方向相反，緩慢移向陰極。故通過適當安排抗原和抗體孔的位置，在短期內(30-60分鍾)抗原和抗體可以相遇，結果在兩孔間形成沉澱線。
1. 實驗材料和用具
(1)抗血清
(2)純化病毒或病汁液
(3)0.05M巴比妥緩衝液,pH8.6，10％NaN3，1.5％SDS，瓊脂糖(電泳用)。
(4)載玻片、打孔器、微量加樣器、飯盒、電泳儀和水平電泳槽、4℃冰箱。
2. 實驗步驟
(1)洗淨載玻片，泡在乙醇中，使用前取出擦幹備用。
(2)用緩衝液配製1％瓊脂糖凝膠，煮化後加入0.02％NaN3，80℃水浴中備用。
(3)在微量離心管中將等量的1.5％SDS和提純病毒混勻，開水浴中煮2-4分鍾備用。
(4)用吸管吸取2ml瓊脂糖凝膠，加在載玻片上，注意保持液麵水平，分布均勻，厚度為2mm，室溫下放置15分鍾，移入冰箱10分鍾使其充分凝固。
(5)在凝膠上打孔，根據樣品數量打兩排孔，孔徑3mm，孔距3mm，排距5mm，分別標記為陽極和陰極。
(6)去掉孔內凝膠，抗原和待測樣品(可以作適當稀釋)包括陽性和正常對照樣品加在陰極側一排孔中，注意不要溢出(1mm厚的凝膠加10μl)；在另一排孔中加入抗體(可用PBS稀釋)。
(7)將玻片放入水平電泳槽，用紗布或濾紙連好電橋，抗原孔端聯負極,抗體孔端聯正極。以0.05M 巴比妥pH8.6為電泳緩衝液，電流量為4V/cm片，電泳30-60分鍾，待沉澱線可見為止。
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