一. 目的
在植物病毒研究中,有時很難或不必要先提純病毒後再分離病毒RNA，而是直接將病葉中包括病毒RNA在內的植物總RNA大分子分離出來，獲得的總RNA可用於RT- PCR 、點雜交、northern雜交和分離植物抗病基因差異表達的cDNA 的方法（DDRT- PCR ）。本實驗學習用酚-SDS-LiCl法提取病毒RNA。
二.實驗材料
TMV、CMV或其它病毒等侵染的新鮮或冰凍葉片。
三.實驗用儀器及藥劑
高速離心機，真空幹燥儀，微量取樣器，1.5mL離心管
抽取緩衝液(20mMTris-HClpH8.0；1%SDS；200mMNaCl；5mMEDTA)
飽和苯酚/氯仿(1 ∶1)，氯仿/異戊醇(24 ∶1)，4MLiCl，70%的乙醇，DEPC處理後滅菌蒸餾水。
四.實驗步驟
1.取適量病毒侵染病葉於研缽內，加液氮，將材料研磨成極細粉末，取300-500mg粉末放入1.5mL離心管中，
2.加入加300-500 μl抽提緩衝液
3.加等體積飽和苯酚/氯仿(400 μl)，輕微振蕩混合2-5分鍾
4.12000rpm離心5分鍾
5.取上清水相，再加等體積飽和苯酚/氯仿，混合抽提
6.12000rpm離心2分鍾
7.加等體積氯仿/異戊醇(24 ∶1)抽提一次
8.取上清水相，加等體積冷4MLiCl，混勻、置4℃下3小時以上
9.12000rpm離心15分鍾
10.倒去上清,沉澱用70%冷乙醇(0.5ml)洗滌3次
11.真空幹燥,3～5分鍾
12.沉澱溶於20 μl滅菌重蒸餾水中,-20℃保存
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