革蘭陽性球菌的鑒定

革蘭陽性球的菌鑒定Identification of Gram-positivc cocci

( 一) 革蘭陽性球菌的基本特征

在血瓊脂平板上生長，但在麥康凱、伊紅亞甲藍、中國藍瓊脂平板上不生長，提示為革蘭陽性球菌。但有些非發酵菌(如：艾肯菌屬、金氏杆菌屬、心杆菌屬等)在麥康凱平板上也不生長。

( 二) 革蘭陽性球菌的基本鑒定試驗要求

觸酶試驗是鑒定革蘭陽性球菌的重要試驗(任何革蘭陽性球菌必須先做觸酶試驗) ，此試驗不宜碰到血瓊脂，因為紅細胞內含有過氧化物酶，操作過程中若沾染紅細胞可造成假陽性。

凝固酶試驗是鑒定葡萄球菌的重要試驗，此試驗有玻片法和試管法。須注意以下幾點。

(1 ) 有些葡萄球菌(昂和葡萄球菌、施氏葡萄球菌)凝固酶試驗玻片法陽性，試管法驗證陰性，因其產生聚集因子。有些金黃色葡萄球菌玻片法陰性，試管法陽性，因該金黃色葡萄球菌無結合凝固酶，有遊離凝固酶。

(2) 試驗可使用EDTA 抗凝的兔血漿，不能使用枸櫞酸鹽抗凝，因為有些細菌可分解枸櫞酸鹽，可出現假陽性。

(3)高鹽甘露醇瓊脂平板上的菌落不能用於凝固酶試驗，因高鹽可致菌體自凝。

( 三) 作為推測性鑒定的重要試驗

1.菌落特征

(1)溶血： 血平板上的溶血有助於一些細菌的初步鑒定，如金黃色葡萄球菌、鏈球菌屬等。

α 溶血: α溶血使菌落周圍的血液部分溶解，其結果是菌落周圍有一個草綠色的環，疑似肺炎鏈球菌和草綠色鏈球菌。

ß溶血: ß 溶血菌落周圍的血液完全溶血，是由於紅細胞完全被溶解所致，如A 群ß溶血鏈球菌(化膿性鏈球菌)產生寬闊清晰的溶血環；B群ß溶血鏈球菌(無乳鏈球菌)和產單核細胞李斯特菌產生一個狹窄的分散溶血環。

(2) 衛星現象: 乏養菌屬、Granulicatella elegans

 2 . 鏡下形態

(1)革蘭陽性球形、葡萄狀、單個、成雙的疑似葡萄球菌屬。

(2) 革蘭陽性球狀、球杆狀、鏈狀(短鏈)排列、鏈的長短不一(液體培養基中為長鏈，固體培養基中為短鏈，短鏈由4~8 個細菌組成、長鏈可達20~30 個)的疑似鏈球菌屬。

(3) 革蘭陽性矛頭狀、成雙或短鏈排列的疑似肺炎鏈球菌。

(4) 革蘭陽性球杆狀、成雙、鏈狀的疑似乳球菌屬、明串珠球菌屬、格魯比卡菌屬等。

(5) 革蘭陽性球狀、球杆狀的疑似乏養菌屬等。

(6) 革蘭陽性球狀、成雙、鏈狀、成簇的疑似氣球菌屬、孿生球菌屬、創傷球菌屬、片球菌屬等。

(7)革蘭陽性球杆狀、成雙、四聯狀的疑似差異球菌屬等。

(8) 革蘭陽性球狀、成雙、成簇的疑似口腔球菌屬等。

(9) 革蘭陽性球狀、成簇、四聯狀的疑似微球菌屬等。

注: 溶血孿生球菌扁平的側麵相鄰，常是雙球狀。

3 . 觸酶試驗

(1)觸酶試驗陰性的革蘭陽性球菌: 金黃色葡萄球菌厭氧亞種、解糖葡萄球菌、鏈球菌屬、腸球菌屬、乏養菌屬、氣球菌屬、狡詐球菌屬、費克藍姆菌屬 、孿生球菌屬、格魯比卡菌屬、創傷球菌屬 、Lgnavigranum 、乳球菌屬、明串珠球菌屬(Leuconostoc) 、足球菌屬(Pediococcus) 、Granulicatella 、Tetragenococcus 、Vagococcus 。

(2) 觸酶試驗陽性的革蘭陽性球菌：葡萄球菌屬、微球菌屬、口腔球菌屬、動球菌屬、克氏考可菌屬、差異球菌屬、Rothia mucilaginosa等。

4 . 凝固酶試驗凝固酶試驗陽性的葡萄球菌：金黃色葡萄球菌金黃色亞種、金黃色葡萄球菌厭氧亞種、施氏葡萄球菌聚集亞種、中間葡萄球菌、S. Lutrae 、豬葡萄球菌（l l % ~89 % 陽'性) 。值得注意的是，如果菌落特征、鏡下形態符合葡萄球菌、觸酶陰性，應先用準確的方法作凝固酶試驗，陽性為金黃色葡萄球菌慶氧亞種，陰性再進一步鑒定。

5 . 高鹽甘露醇試驗  高鹽甘露醇試驗陽性的葡萄球菌： 金黃色葡萄球菌。但有報道，少見的葡萄球菌也能分解高鹽甘露醇，故應用凝固酶試驗驗證。

6. CAMP 試驗  CAMP 試驗陽性的革蘭陽性球菌： B 群(無乳)鏈球菌。

7. 杆菌肽敏感試驗  杆菌肽敏感的革蘭陽性球菌： A 群鏈球菌(化膿性鏈球菌) 。

8. Optochin 試驗 Optochin 試驗陽性的革蘭陽性球菌：肺炎鏈球菌。

9. 吡咯烷酮芳基酰接酶(PYR)  試驗陽性的革蘭陽性球菌： 腸球菌、化膿鏈球菌、草綠色氣球菌和某些凝固酶陰性葡萄球菌等。直接取細菌培養物，塗在含有PYR 的紙片上，置35℃孵育5 min ，滴加顯色劑若陽性則可顯紅色，無顏色改變為陰性。

1 0 . 觸酶試驗   觸酶陰性革蘭陽性球菌的鑒定

11. 雙歧法試驗  常見凝固酶陰性葡萄球菌的鑒定

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