一、測定微生物的大小
1. 測定的工具:目鏡測微尺 鏡台測微尺
2. 目鏡測微尺的校正:在高倍鏡下,看清鏡台測微尺的刻度後,轉動目鏡,使目鏡測微尺與鏡台測微尺的刻度平行,移動推動器,使目鏡測微尺的0點與鏡台測微尺的某一刻度重合,然後,仔細尋找兩尺第二個完全重合的刻度。計算兩刻度間目鏡測微尺的格數和鏡台測微尺的格數。由於鏡台測微尺的刻度每格長10µm,所以可得:
目鏡測微尺每格長度( µm)=(鏡台測微尺格數×10)/目鏡測微尺格數
注意:校正目鏡測微尺必須針對特定的顯微鏡和附件(特定的接物鏡、接目鏡、鏡筒長度等)進行,而且隻能在這特定的情況下才可重複使用。
3. 菌體大小的測定:取下鏡台測微尺,將細菌染色標本置於載物台上,然後在油鏡下用目鏡測微尺測量菌體的長和寬。
二、測定微生物數量
方法:活菌計數法——平板菌落計數法;總菌計數法——血球計數板或霍瑟(Peroff Hausser)細菌計數板(二者原理和部件相同,隻是厚薄不同而已)。
本實驗用血球計數板計數酵母菌的數量
1. 取清潔無油的血球計數板,在計數室上麵加蓋玻片。
2. 取酵母菌液,搖勻,用滴管由蓋玻片邊緣滴一小滴,使菌液自行滲入,計數室內不得有氣泡。
3. 靜止5min後,用低倍鏡觀察並將計數室移至視野中央。
4. 在高倍鏡下計數:隨機計數五個中格的平均值,然後求得每個中格的平均值。乘上16(或25)就得出一大格中的總菌數,最後再換算到每mL菌液中的含菌數。
5. 計算方法:
酵母菌細胞數/mL=[(X1+X2+X3+X4+X5)/5]X 25(或16)X 10 X 1000 x 稀釋倍數
6. 注意事項:壓在方格線上的菌體,以壓在底線和右側線上的菌體計入本格內;遇到有芽體的酵母時,若芽體和母體同等大,就按單個酵母計數。
7. 計數完畢後,血球計數板要立即清洗幹淨,並用吸水紙吸幹,最後用擦鏡紙擦幹淨,並放回盒內。
上一篇:革蘭陽性球菌的鑒定