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實驗 馬丁氏培養基的製備



錄入時間:2011-12-21 10:42:15 來源:互聯網

 

     一、目的要求

     通過對分離真菌用的馬丁氏(Martin)培養基配製,掌握對選擇培養基的配製方法,並明確選擇的原理。

     二、基本原理

     馬丁氏培養基是一種用來分離真菌的選擇性培養基。此培養基是由葡萄糖、蛋白腖、KH2PO4MgSO47H2O、孟加拉紅(玫瑰紅,Rose Bengal)和鏈黴素等組成。其中葡萄糖主要作為碳源,蛋白腖主要作為氮源,KH2PO4MgSO47H2O作為無機鹽,為微生物提供鉀、磷和鎂離子。而孟加拉紅和鏈黴素主要是細菌和放線菌的抑製劑,對真菌無抑製作用,因而真菌在這種培養基上可以得到優勢生長,從而達到分離真菌的目的。

     馬丁氏培養基配方如下:

     KH2PO4 1g

     MgSO47H2O 05g

     蛋白腖 5g

     葡萄糖 10g

     瓊脂 1520g

     1000ml

     pH 自然

     此培養液1000ml1%孟加拉紅水溶液33ml。臨用時每100ml培養基中加1%鏈黴素液03ml

     三、器材

     KH2PO4MgSO47H2O,蛋白腖,葡萄糖,瓊脂,孟加拉紅,鏈黴素;

     試管,三角燒瓶,量筒,玻棒,培養基分裝器,扭力天平,牛角匙,高壓蒸汽滅菌鍋等。

     四、操作步驟

     1.稱量和溶化

     按培養基配方,準確稱取各成分,並將各成分依次溶化在少於所需要的水量中。待各成分完全溶化後,補足水分到所需體積。再將孟加拉紅配成1%的溶液,在1000ml培養液中加入1%的孟加拉紅溶液33ml,混勻後,加入瓊脂加熱溶化(方法同實驗十九)。

     2.分裝、加塞、包紮、滅菌,無菌檢查與實驗十九相同。

     3.鏈黴素的加入

     由於鏈黴素受熱容易分解,所以臨用時,將培養基溶化後待溫度降至45℃左右時才能加入。可先將鏈黴素配成1%的溶液,在100ml培養基中加1%鏈黴素液03ml,使每毫升培養基中含鏈黴素30μg

     五、實驗報告

     思考題

     1)什麽是選擇培養基?它在微生物學工作中有何重要性?

     2)培養細菌、放線菌、酵母菌、黴菌的最適pH值各為多少?

 

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