實驗目的
1.觀察黴菌菌落特征。
2.學習並掌握黴菌的製片方法。
3.了解四類常見黴菌的基本形態特征。
實驗內容
1.黴菌菌落特征的觀察;
2.黴菌的水浸片觀察。
實驗原理
黴菌可產生分枝的菌絲體,分為基內菌絲和氣生菌絲,氣生菌絲生長到一定階段分化產生繁殖菌絲,由繁殖菌絲產生孢子。黴菌菌絲體(尤其是繁殖菌絲)及孢子的形態特征是識別不同種類黴菌的重要依據。黴菌菌絲和孢子的寬度通常比細菌和放線菌粗得多 (約為 3~10μm),常是細菌菌體寬度的幾倍至幾十倍。菌落形態較大,質地較疏鬆,顏色各異。菌絲體經製片後可用低倍顯微鏡或高倍鏡觀察。
黴菌菌絲較粗大,細胞易收縮變形,且孢子容易飛散,所以製標本時常用乳酸石炭酸棉藍染色液。此染色液製成的黴菌標本片的特點是:細胞不變形,具有殺菌防腐作用,且不易幹燥,能保持較長時間,溶液本身呈藍色,有一定染色效果。
實驗器材
曲黴(Aspergillus sp.),青黴,根黴(Rhizopus sp.)和毛黴(Mucor sp.)培養 2~5d的馬鈴薯瓊脂平板培養物。
乳酸石炭酸棉藍染色液。
載玻片、蓋玻片、接種針、顯微鏡等。
實驗步驟
1.黴菌菌落特征的觀察:觀察曲黴,青黴,根黴和毛黴平板中的菌落,描述述其菌落特征。注意菌落形態的大小,菌絲的高矮,生長密度,孢子顏色和菌落表麵等狀況。並與細菌、放線菌、酵母菌菌落進行比較。
2.製水浸片觀察:於潔淨的載片中央,滴加一小滴乳酸石炭酸溶液,然後用接種針從菌落邊緣挑取少許菌絲體置於其中,使其攤開,輕輕蓋上蓋片(注意勿出現氣泡),置於低倍鏡、高倍鏡下觀察。
(1) 曲黴:
觀察菌絲體有無橫隔、足細胞,注意分生孢子梗、頂囊、小梗及分生孢子著生狀況及形狀。
(2) 青黴:
觀察菌絲體的分枝狀況,有無橫隔。分生孢子梗及其分枝方式、梗基、小梗、分生孢子的形狀以及分生孢子穗,帚狀分枝的層次狀況。
(3) 根黴:
觀察菌絲是否有橫隔、假根、匍匐枝、孢子囊梗、孢子梗及孢囊孢子。觀察孢囊破裂後的囊托及囊軸。
(4) 毛黴:
觀察菌絲是否有橫隔、菌絲的分枝情況以及孢囊孢子。
實驗結果及討論
1.實驗結果
(1) 曲黴、青黴、根黴和毛黴的菌落顏色及特征。
(2) 繪製曲黴、青黴、根黴和毛黴的個體形態圖,並注明各部位名稱。
2.討論
針對實驗原理、步驟、現象進行討論。
實驗作業:
1.總結在顯微鏡下看到的曲黴、青黴、根黴和毛黴在以下各方麵的異同:
(1) 菌絲有隔或無隔。
(2) 無性繁殖的方式。
(3) 有性繁殖的方式。
2.你主要根據哪些形態特征來區分上述四種黴菌?
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