免疫熒光技術
免疫熒光技術是用熒光素標記的抗體檢測抗原或抗體的免疫學標記技術,又稱熒光抗體技術。所用的熒光素標記抗體通稱為熒光抗體,係由熒光素(常用異硫氰基熒光黃,F1TC)以化學方法與效價較高、活性較強的抗體共價結合後製備而成。免疫熒光技術在實際應用上主要有直接過和間接法。
免疫測定法的代表技術是ELISA技術,是抗原或抗體吸附到固相載體上作為一種試劑來檢測標本中有無相應的抗體或抗原的一種方法。根據反應原理,加入某種酶標記的抗體或抗原,洗滌除去未結合物,加入該酶的底物,酶催化底物生成有色產物,產物的量與標本中受檢物的量有關,根據反應顏色的深淺可定量測定。EIA在微生物學領域中可用於病原的檢測、抗體檢測和細菌代謝產物的檢測。EIA具有高度的特異性和敏感性,幾乎所有可溶性的抗體抗原反應係統均可檢測,最小可測值能夠達到ng甚至pg水平。與放射免疫方法相比較,EIA的標記試劑較穩定,且無放射性危害;與免疫熒光技術相比,EIA敏感性高,不需特殊設備,結果觀察簡便。酶免疫技術發展較晚,但隨著試劑的商品化以及自動化操作儀器的廣泛使用,己使酶免疫技術日趨成熟,方法穩定,結果可靠,在很多領域取代了熒光技術和放射免疫測定法。
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