支原體培養檢驗操作程序
一、接收標本:標本與檢驗單查對正確,標本質量合格。
二、標本處理:接種Uu、Mh 培養藥敏一體試劑盒:操作前將所需試劑取出置室溫30 分鍾。1、A 排第一孔加入培養液100μL 作為陰性對照;2、將標本拭子直接放入培養液中充分振蕩並在瓶壁擠幹拭子,若為男性尿液取離心沉澱物150μL 或陽性標本取50μL 於培養液中混勻。3、將混有標本的培養液各100μL 加入A 排餘下及B 排各孔中;4、各孔加礦物油覆蓋,置於37℃溫箱培養。
第24、48 小時分別觀察記錄結果。結果判斷原理:培養基含有相應支原體生長所需的蛋白質、馬血清、生長因子、底物及酚紅指示劑,當有支原體生長時,底物被分解,使PH 值升高,培養基由橙黃色變成紅色,且清亮為陽性。培養基不變色為陰性。B1 孔陽性為解脲支原體陽性;B2孔陽性為人型支原體陽性。藥敏孔A 排為高濃度,B 排為低濃度,變紅則耐藥,不變紅示敏感而不生長。當高濃度與低濃度兩孔均不生長(不變色)為該藥敏感;高濃度不變色低濃度變紅為該藥物中介;高濃度與低濃度均變紅為該藥物耐藥。
結果一:第24 小時B1 孔由橙黃色變成紅色示解脲支原體陽性,藥敏看結果判斷;第24 小時、48 小時觀察B2 孔均不變色,示無人型支原體生長或濃度極低,報告培養出解脲支原體,未培養出人型支原體。
結果二:第24 小時B1 孔不變色示解脲支原體陰性;第48 小時觀察B2 孔由橙黃色變成紅色示人型支原體陽性,藥敏看結果判斷。報告未培養出解脲支原體,培養出人型支原體附藥敏結果。
結果三:第24 小時B1 孔由橙黃色變成紅色示解脲支原體陽性,藥敏看結果判斷;第48 小時觀察B2 孔由橙黃色變成紅色示人型支原體陽性,藥敏看結果判斷,報告培養出解脲支原體與人型支原體附藥敏結果。
結果四:陽性對照孔由橙黃色變成紅色示支原體陽性,藥敏看結果判斷;第24 小時、48 小時觀察B1 孔、B2 孔均不變色,示無解脲、人型支原體生長或濃度極低,報告培養出非解脲、人型支原體或囑病人重留標本複查。
結果五:第24、48 小時觀察B1 孔、B2 孔均不變色,示無支原體生長或濃度極低,報告未培養出解脲及人型支原體。
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