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沙門菌的微生物學檢查



錄入時間:2012-4-19 16:34:02 來源:醫學教育網

    1.標本采集:根據不同疾病采取不同的標本進行分離與培養。腸熱症的第一、二周采血液,第二、三周采糞便與尿液。整個病程中骨髓分離細菌陽性率較高。食物中毒采集食物與糞便。

  2.檢查方法及鑒定

  (1)分離培養

  1)糞便:一般將糞便或肛拭直接接種於SS和麥康凱平板上,用兩種培養基的目的是為提高標本的陽性檢出率。

  2)血液和骨髓:抽取患者血液5ml或骨髓0.5ml,立即接種於含0.5%膽鹽肉湯或葡萄糖肉湯5ml試管中進行增菌,48h將培養物移種到血平板和腸道鑒別培養基上,若有細菌生長取菌塗片革蘭染色並報告結果。對增菌培養物連續培養7天,仍無細菌生長時,則報告陰性。

  3)尿液:取尿液2~3ml經硫磺酸鹽肉湯增菌後,再接種於腸道菌選擇培養基或血平板上進行分離培養,亦可將尿液離心沉澱物分離培養。

  4)局部感染的膿液。

  (2)鑒定:沙門菌屬的鑒定與誌賀菌屬相同,須根據生化反應和血清學鑒定兩方麵進行。

  1)初步鑒定:如為革蘭陰性杆菌時作氧化酶試驗,陰性時,挑取可疑菌落分別移種於KIA和MIU上。並作生化反應。以沙門菌多價診斷血清作玻片凝集試驗。

  凡符合KIA:K/A、產氣+/-、H2S+/-、MIU:動力+、吲哚-、脲酶+,氧化酶-,觸酶+,硝酸鹽還原+,以沙門菌多價血清作玻片凝集試驗陽性,鑒定為沙門菌屬。

  2)最後鑒定:沙門菌血清學鑒定主要借助於沙門菌O抗原多價血清與O、H、Vi抗原的單價因子血清。甲型副傷寒沙門菌、鼠傷寒沙門菌和傷寒沙門菌分別屬於A、B、D血清群。 

  (3)血清學診斷:肥達試驗:用已知的傷寒沙門菌0、H抗原,甲乙丙副傷寒沙門菌H抗原稀釋後與被檢血清作定量凝集試驗,以檢測患者血清中抗體的含量,來判斷機體是否受沙門菌感染而導致腸熱症並判別沙門菌的種類。

 

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