1、取材與處理
取火鶴花植株莖端,在超淨工作台無菌條件下洗淨,用自來水衝洗15-20分鍾,再用70%酒精浸泡30秒,再用0.2%升汞消毒3-6分鍾,之後用滅菌水漂洗3-5次,在解剖鏡下剝離2-3mm的莖尖,接種與誘導培養基中(MS+6BA5.0-10.0mg/L+IBA1.0-3.0mg/L),置培養室培養。
2、確定培養條件
環境條件PH5.8,培養溫度(26±2)℃,采用自然散射光,光照10-12h/d,光照強度1000-2000lx,光照10-12h/d。
3、繼代培養與擴散繁殖
經3-4周培養,莖尖膨大,呈綠色愈傷組織塊。將愈傷組織切割接種到繼代培養基(MS+6BA0.5-2.0mg/L+IBA0.1-1.0mg/L)中,經5-6周培養,產生芽點,長成小苗。如果需要可以在繼代培養基上迅速擴大繁殖。
4、生根
將2cm左右的試管苗,接到1/2M+IBA0.1-0.3mg/L的培養基上。培養2-4周即可生根。
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