一、流程：
檢樣xg/mL+9xml稀釋液（磷酸鹽緩衝液）→適當十倍稀釋樣品→選擇2~3個連續適宜稀釋度→各取1mL分別加入滅菌平皿內（每個稀釋度做兩個平行）→每皿內加入適量（12~15mL）(如果懷疑樣品中含有在培養基表麵蔓延生長的菌落，待瓊脂凝固後，在其上覆蓋一層（4mL）水瓊脂)→平板計數瓊脂（PCA），30±1 ℃ ，72 ±3 h→菌落計數
二、方法：
選擇連續2個稀釋度不超過300CFU的平板，且一個平板至少含15CFU進行計數，計算公式如下：
N=∑C/（n1+0.1*n2）*d
所有平板的菌落數都不足15CFU，計算2平板菌落的算術平均值m，液體樣品：NE=m
固體樣品： NE=m×d-1
無菌生長：液體樣品：less than 1; 固體樣品：less than 1 ×d-1
最終結果保留前兩位有效數字。
三、菌落總數測定幾點說明：
由於檢樣中采用30/35℃有氧條件下培養，因而並不是樣品中實際的總活菌數，一些特殊營養要求的細菌、厭氧菌、微需氧菌、以及非嗜中溫細菌，均難以反映出來。
鑒於食品檢樣中的細菌細胞是以單個、成雙、鏈狀、葡萄狀或成堆的形式存在，因而在平板上出現的菌落可以來源於細胞塊，也可以來源於單個細胞，因而平板上所得菌落的數字不應報告活菌數，而應以單位重量、容積或表麵積內的菌落數或菌落形成單位（colony forming units，CFU）報告。
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