一、基本原理：
革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種重要的鑒別染色法。1884年由丹麥醫師Gram創立。此法可將細菌分為革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌兩大類。
革蘭氏染色的機理主要是利用兩類細菌的細胞壁成分和結構的不同。革蘭氏陰性菌的細胞壁中含有較多的類脂質，而肽聚糖的含量較少。當用酒精或丙酮酸脫色時，類脂質被溶解，增加了細胞壁的通透性，使初染後的結晶紫和碘的複合物易於滲出，結果細胞被脫色，經複染後，又染上複染液的顏色。而革蘭氏陽性菌細胞壁中肽聚糖的含量多而且交聯度大，類脂質含量少，經乙醇或丙酮洗脫後，肽聚糖層的孔徑變小，通透性降低，因此細胞仍保留初染時的顏色。
二、基本步驟：
將塗片在火焰上固定，滴加結晶紫染液，染1min，水洗；滴加革蘭氏碘液，作用1min，水洗；滴加95%乙醇脫色約15～30s,直至染色液被洗掉，不要過分脫色，水洗；
滴加番紅複染液，複染1min，水洗、待幹、鏡檢。結果：革蘭氏陽性菌呈紫色，革蘭氏陰性菌呈紅色。
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